血小板聚集功能的檢測——光譜學(xué)及軟X線成像研究.pdf

1、目的：為了觀察冠心病患者血小板與健康患者血小板光譜的變化，及了解抗凝藥物對血小板功能的影響。本研究探索性的將紫外光譜、紅外光譜及軟 X線譜學(xué)顯微成像技術(shù)應(yīng)用于血小板及聚集功能的檢測，研究主要是基于臨床上許多疾病血小板都處于活化狀態(tài)，但目前尚無一種檢測方法能夠全面反應(yīng)抗血小板藥物前后血小板生物學(xué)與功能的復(fù)雜性。
　　方法：研究分為臨床與基礎(chǔ)研究兩部分。臨床研究隨機選取老年冠心病病人20例，分氯吡格雷組和阿司匹林組各10例，同時選擇1

2、0名健康老年體檢者作為對照組，知情同意后抽血采用二次離心法提取血小板血漿，采用雙光束紫外光分光光度計獲取血小板聚集前后的紫外光譜并與正常健康對照組進行對照，并用UVWIN5.0軟件分析結(jié)果，另取10名健康體檢者采用液膜法作紅外光譜初步探索性研究。基礎(chǔ)研究采取10只雄性SD大鼠（重量在200g左右）分實驗組（氯吡格雷組5mg/kg·d）和正常對照組（等量生理鹽水），制取血小板采用軟X線譜學(xué)顯微光束線技術(shù)，觀察抗血小板藥物干預(yù)前后對血小板作

3、掃描透射成像形態(tài)及并利用譜學(xué)顯微技術(shù)對聚集前后鈣元素作雙能對比襯度成像。研究結(jié)果采用Origin8.0軟件分析作圖，統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)均采用SPASS13.0處理分析。
　　結(jié)果：1.血小板紫外光譜在204nm和280nm波長處可見吸收峰，血小板聚集后在204nm波長處吸收峰顯著大于聚集前（t氯吡格雷組=3.475，P=0.007；t阿司匹林組=4.539， P=0.001；t對照組=5.003，P=0.001）。冠心病組與正常對照組以及

4、冠心病組內(nèi)氯吡格雷組和阿司匹林組血小板紫外光譜波峰出現(xiàn)的位置未顯示出差異,均出現(xiàn)在204、208nm波長。
　　2.血小板紅外光譜在代表氫單鍵彎曲振動的1550cm-1波長附近及代表CO2振動的2360cm-1波長，和代表亞甲基單鍵振動及單鍵伸縮振動的2930 cm-1、3300 cm-1波長出現(xiàn)特異性波峰，聚集后紅外光吸收率增大，但這與 CaF2基片中血小板分布相關(guān)，而前后紅外光譜未見有新的特異性波峰位置出現(xiàn)。
　　3.血

5、小板軟X線掃描成像成像后能看到血小板大小不等，有的可見伸出偽足，但清晰度受分辨率的限制。而鈣元素分布成像則顯示血小板在靜息狀態(tài)時胞內(nèi)鈣元素主要集聚分布于質(zhì)膜一側(cè)凹陷的鈣池，加誘聚劑誘導(dǎo)聚集后則擴散分布在整個胞質(zhì)。正常對照組與氯吡格雷組靜息狀態(tài)的血小板掃描透射成像與鈣元素對比襯度成像受誘導(dǎo)劑及體外活化等多種因素影響，不具有統(tǒng)計學(xué)的差異。
　　結(jié)論：血小板活動及其聚集可在多種物理學(xué)方法顯示出明顯的差異，而這些方法能夠為其功能的檢測提供