1-甲基乙內(nèi)酰脲與5-Fu對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞抑制增殖及誘導(dǎo)凋亡的研究.pdf

1、目的：
　　探索1-甲基乙內(nèi)酰脲與5-氟尿嘧啶單獨(dú)和兩者聯(lián)合對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞的抑制和誘導(dǎo)凋亡作用。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)對(duì)象：體外培養(yǎng)的人胃癌 SGC-7901細(xì)胞株。實(shí)驗(yàn)分組：對(duì)照組（等量PBS）、不同濃度梯度(5mg·L-1,10mg·L-1,20mg·L-1,50 mg·L-1,100 mg·L-1)1-甲基乙內(nèi)酰脲(M)組、不同濃度梯度(5 mg·L-1,10mg·L-1,20mg·L-1,50mg

2、·L-1,100mg·L-1)5-氟尿嘧啶(5-Fu)組、1-甲基乙內(nèi)酰脲與5-Fu(M+5-Fu)聯(lián)合組(M5mg·L-1+Fu5mg·L-1，M10mg·L-1+Fu10mg·L-1，M20mg·L-1+Fu20mg·L-1，M50mg·L-1+Fu50mg·L-1，M100mg·L-1+Fu100mg·L-1)。MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期分布；Western Blot檢測(cè)ERK，P53，F(xiàn)AS

3、，F(xiàn)ASL蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1 MTT分析法檢測(cè)結(jié)果顯示：
　?、?-甲基乙內(nèi)酰脲和5-Fu在5～100 mg·L-1的濃度范圍內(nèi)均能顯著性抑制胃癌SGC-7901細(xì)胞的增殖，其抑制率呈濃度、時(shí)間依賴關(guān)系，隨著濃度的增加抑制率增加，隨著作用時(shí)間的增加抑制率增加。
　?、?-甲基乙內(nèi)酰脲單獨(dú)作用時(shí)，與對(duì)照組相比，各濃度處理下均顯著性抑制SGC-7901細(xì)胞增殖(p<0.05)。
　　③5-Fu

4、單獨(dú)作用時(shí)，各濃度處理下均顯著性抑制SGC-7901細(xì)胞增殖(p<0.05)，且在同一作用時(shí)間下各濃度處理間均存在顯著性差異(p<0.05)。
　?、?-甲基乙內(nèi)酰脲在相同的濃度下作用效果弱于5-Fu。作用24h后，20 mg·L-15-Fu與50 mg·L-1和100 mg·L-11-甲基乙內(nèi)酰脲作用效果不存在顯著性差異(p>0.05)；作用48h后，10 mg·L-15-Fu與50 mg·L-11-甲基乙內(nèi)酰脲作用效果相當(dāng)，差

5、異不顯著(p>0.05)；作用72h后，50 mg·L-11-甲基乙內(nèi)酰脲與10 mg·L-15-Fu及100 mg·L-11-甲基乙內(nèi)酰脲與20 mg·L-15-Fu作用效果相當(dāng)，無顯著性差異(p>0.05)。
　?、?-甲基乙內(nèi)酰脲與5-Fu聯(lián)合作用，作用24h后，二者濃度均為50 mg·L-1的聯(lián)合組作用效果顯著性高于100 mg·L-11-甲基乙內(nèi)酰脲單獨(dú)作用組，同時(shí)其作用效果還顯著性低于100 mg·L-15-Fu單獨(dú)作

6、用組(p<0.05)；作用48h，72h后，50 mg·L-1的聯(lián)合用藥組與100mg·L-15-Fu單獨(dú)用藥組作用效果相當(dāng)(p>0.05)，而顯著性高于100 mg·L-11-甲基乙內(nèi)酰脲單獨(dú)作用組。
　　2 FCM及細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示：相比于對(duì)照組，1-甲基乙內(nèi)酰脲、5-Fu及其二者聯(lián)合的各濃度處理下SGC-7901細(xì)胞凋亡率顯著性上升(p<0.05)。與1-甲基乙內(nèi)酰脲和5-Fu單獨(dú)作用相比，二者聯(lián)合作用的SGC-7901

7、細(xì)胞凋亡率增加，存在顯著性差異(p<0.05)。
　　3 Western Blot結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，1-甲基乙內(nèi)酰脲處理SGC-7901細(xì)胞后，其細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)、抑癌基因(P53)和死亡受體 Fas及其配體 Fas L的表達(dá)均無差異；而5-Fu處理SGC-7901細(xì)胞后，抑癌基因P53表達(dá)無差異變化，細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)和死亡受體Fas及其配體FasL的表達(dá)明顯上調(diào)。
　　結(jié)論：
　　1.1