吳茱萸堿對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞生長抑制及凋亡誘導(dǎo)作用的研究.pdf

1、目的：研究吳茱萸堿對(duì)胃癌 SGC-7901細(xì)胞增殖和凋亡的影響，并探討相關(guān)的作用機(jī)制，從而為吳茱萸堿的抗癌作用提供進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為其開發(fā)成為臨床癌癥治療中的一種新型藥物提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞，1.5μmol/l吳茱萸堿作用于SGC-7901細(xì)胞12h、24h、36h、48h后：①倒置顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化。②PI單染流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期分布情況。③Annexin V-F

2、ITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況。④采用 caspase活性測定試劑盒檢測細(xì)胞中caspase3、caspase8和caspase9的活性。⑤Western Blot檢測細(xì)胞中 caspase3、caspase8、caspase9、Bax、Bcl-2的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：①倒置顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察，經(jīng)吳茱萸堿作用的胃癌SGC-7901細(xì)胞表現(xiàn)出典型的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征。②PI單染結(jié)果顯示，吳茱萸堿影響了胃癌SGC-

3、7901細(xì)胞周期分布，使細(xì)胞周期阻滯于G2/M期。③Annexin V-FITC/PI雙染結(jié)果顯示，吳茱萸堿誘導(dǎo)了胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡。④比色法檢測caspase活性結(jié)果顯示，吳茱萸堿作用24h、36h后，胃癌 SGC-7901細(xì)胞中 caspase3、caspase8和caspase9的活性均增高。⑤Western Blot檢測結(jié)果顯示，吳茱萸堿作用24h、36h，胃癌SGC-7901細(xì)胞中caspase3、 caspase8

4、、caspase9和bax的表達(dá)量均增加。吳茱萸堿作用12h、24h時(shí)，bcl-2的表達(dá)量增加；吳茱萸堿作用36h、48h時(shí)，bcl-2的表達(dá)量降低。
　　結(jié)論：吳茱萸堿通過使細(xì)胞周期阻滯于 G2/M期抑制了胃癌 SGC-7901細(xì)胞的增殖，同時(shí)當(dāng)吳茱萸堿作用一定時(shí)間后，可引起caspase3、caspase8和caspase9活性的增強(qiáng)，增加caspase3、caspase8和caspase9的蛋白表達(dá)，增加bax的蛋白表達(dá)，降