利奈唑胺耐藥腸球菌危險(xiǎn)因素調(diào)查及萬(wàn)古霉素耐藥屎腸球菌毒力因子和轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、目的：探討2012-2013年我院利奈唑胺耐藥腸球菌（Linezolid-resistant enterococci，LRE）感染危險(xiǎn)因素以及萬(wàn)古霉素耐藥屎腸球菌(Vancomycin-resistant Enterococcus faecium，VREfm)的耐藥基因、毒力因子表達(dá)和轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)分析。
　　方法：采用病例-對(duì)照回顧性分析對(duì)我院2012年至2013年分離的LRE進(jìn)行相關(guān)危險(xiǎn)因素調(diào)查。同時(shí)，該段時(shí)間段內(nèi)分離的VREfm

2、采用微量肉湯稀釋法進(jìn)行驗(yàn)證，采用梅里埃VITEK2對(duì)各種抗生素進(jìn)行藥敏檢測(cè)，采用PCR（Polymerase chain reaction，PCR）及測(cè)序技術(shù)檢測(cè)菌株中的萬(wàn)古霉素耐藥基因vanA、vanB和vanC和毒力因子asa1、acm、cylA、esp、gelE、hyl、sagA的表達(dá)情況，以及采用引物重疊PCR的方法進(jìn)行轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)分析。
　　結(jié)果：1. LRE危險(xiǎn)因素調(diào)查結(jié)果顯示，腸道灌洗、入住ICU、利奈唑胺先前使用是其

3、獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　2.2012年至2013年我院共檢出腸球菌1462株，VREfm18株，約占1.23％。VREfm主要分離自尿液標(biāo)本（14株，77.8%），醫(yī)院科室分布主要來(lái)自神經(jīng)內(nèi)科（6株，33.3%）和呼吸內(nèi)科（4株，22.2%）。
　　3.藥敏結(jié)果顯示：18例VREfm分離株對(duì)替考拉寧以及萬(wàn)古霉素均表現(xiàn)較高程度耐藥（TEC≥32μg/ml、VAN≥128μg/ml），屬于vanA表型耐藥。全部菌株對(duì)青霉素、左氧氟沙

4、星、氨芐西林、環(huán)丙沙星、紅霉素均呈現(xiàn)耐藥，對(duì)利奈唑胺、替加環(huán)素、奎奴普丁-達(dá)福普汀的敏感率高達(dá)100%，其中約有77.8%的菌株對(duì)四環(huán)素表現(xiàn)敏感。本研究還發(fā)現(xiàn)18例VREfm分離株均為多重耐藥菌株。
　　4.毒力因子檢測(cè)結(jié)果顯示，18株VREfm實(shí)驗(yàn)組中acm、esp、hyl三種毒力因子檢出率相對(duì)較高，分別為94.4%（17/18）、88.9%（16/18）、83.3%（15/18），而在72株VSEfm對(duì)照組中這三種毒力因子的檢

5、出率分別為61.1%（44/72）、54.2%（39/72）以及55.6%（40/72），并且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從毒力因子聯(lián)合表達(dá)來(lái)看，實(shí)驗(yàn)組中同時(shí)表達(dá)這三種毒力因子的菌株約占77.8%，而在對(duì)照組中該比例僅占36.1%。
　　5.轉(zhuǎn)座子Tn1546結(jié)構(gòu)分析顯示，我院18株VREfm可分為四個(gè)型別，其中C型所占比例最多（8/18），其余類型為D型(6/18)、B型(2/18)和A型(2/18)。
　　結(jié)論：我院VREfm菌株主

6、要分離自尿液標(biāo)本，標(biāo)本的病區(qū)來(lái)源以神經(jīng)內(nèi)科為主；這些菌株對(duì)替考拉寧和萬(wàn)古霉素均呈現(xiàn)較高程度耐藥且所有菌株均存在多重耐藥現(xiàn)象。我院VREfm菌株均為vanA型，未發(fā)現(xiàn)vanB和vanC等其他類型菌株存在。從毒力因子分布來(lái)看，我院VREfm菌株以acm、esp、hyl三種毒力因子為主且多數(shù)菌株存在三種毒力因子共表達(dá)的現(xiàn)象。轉(zhuǎn)座子Tn1546共檢測(cè)到四種型別。從利奈唑胺耐藥腸球菌的危險(xiǎn)因素調(diào)查結(jié)果來(lái)看，侵入性操作和先前抗生素是其主要的危險(xiǎn)因子