循環(huán)lncRNA H19對乳腺癌的診斷價值及其遺傳易感性研究.pdf

1、第一部分循環(huán)lncRNA H19對乳腺癌的潛在診斷價值
　　目的：探討血漿中l(wèi)ncRNA H19表達水平及其對乳腺癌的潛在診斷價值。方法：首先采用實時定量PCR（RT-PCR）方法初步檢測H19在24例乳腺癌組織和30例乳腺癌血漿中的表達情況，進而擴大樣本驗證H19在97例乳腺癌患者血漿中的表達水平并分析血漿H19與臨床病理特征相關性；隨后采用電化學發(fā)光免疫測定法（ECLI）檢測30例乳腺癌早期患者血漿中CEA、CA153表達水平

2、，并建立logistic回歸模型分析血漿中H19相對于傳統(tǒng)標記物CEA和CA153對乳腺癌診斷價值及3項指標聯(lián)合后診斷價值；最后采用定量PCR的方法檢測24位乳腺癌患者術前和術后血漿中H19表達水平，以評價血漿中的H19對患者體內腫瘤動態(tài)監(jiān)測情況。
　　結果：
　　1、H19在乳腺癌組織和血漿中表達增高（P均<0.05），且血漿中H19的表達水平與雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、c-erbB-2和淋巴結轉移明顯相關，

3、而與患者年齡、病理類型、腫瘤分期及Ki-67不具有相關性。
　　2、血漿H19對乳腺癌的診斷效能（AUC=0.81）明顯高于乳腺癌傳統(tǒng)標記物 CA153（AUC=0.66，P=0.014）和 CEA（AUC=0.52，P=0.003），且3項指標聯(lián)合后診斷效能（AUC=0.84）高于H19單獨檢測。
　　3、乳腺癌患者術后10天血漿H19表達水平較術前明顯降低（P=0.0006）。結論：
　　血漿高表達的H19可作為乳

4、腺癌診斷和臨床監(jiān)控的一個潛在的新型生物標志物。
　　第二部分長鏈非編碼RNA H19單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌的遺傳易感性
　　目的：研究長鏈非編碼RNA H19單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性之間的關系，為乳腺癌的早期診斷、分子靶向治療提供理論依據(jù)。
　　方法：收集乳腺癌初診患者全血標本500例，健康對照組標本500例。采用生物信息學軟件篩選中國漢族人群中H19的標簽SNP，利用限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反應方法（ P

5、CR-RFLP），檢測篩選出的標簽 SNP rs3741219、rs217727和 rs2107425并進行基因分型，然后利用Hardy-Weinberg定律進行平衡性檢驗，最后采用卡方檢驗和logistic回歸分析來分析各相關SNP與乳腺癌發(fā)生的相關性。
　　結果：
　　1、乳腺癌的發(fā)病風險與乳腺癌家族史具有明顯的相關性（OR=1.72，95％CI=1.20-2.47，P=0.004）。H19 rs217727TT基因型（

6、校正OR=1.38，95%CI=1.06-2.21， P=0.01）和 rs2107425AA基因型（校正 OR=1.58，95%CI=1.12-2.19，P=0.02）可明顯增加乳腺癌的發(fā)病風險。
　　2、H19 rs217727 CT+TT基因型與乳腺癌的發(fā)病風險明顯與妊娠個數(shù)相關，妊娠個數(shù)>2時乳腺癌的發(fā)病風險增加（ OR=1.36，95% CI=0.87-1.99， P=0.04），且rs217727 CT+TT基因型與乳

7、腺癌患者ER陽性相關；rs2107425 GA+AA基因型與乳腺癌的發(fā)病風險明顯與流產個數(shù)相關，流產個數(shù)>2個可增加乳腺癌的發(fā)病風險（OR=1.65，95%CI=1.12-3.26，P=0.02），然而rs2107425GA+AA基因型與乳腺癌臨床病理特征不具有相關性。
　　3、H19rs3741219T>C多態(tài)性位點T-C堿基的改變可能在H19上創(chuàng)建一個hsa-miR-1539 microRNA結合位點，從而獲得miRNA與ln