甲基化抑制劑5-Aza-CdR對肺癌A549細胞株DNMT1及c-myc,MKi-67,P53基因表達的影響.pdf

1、目的：探討甲基化抑制劑5-氮雜-2’脫氧胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine，5-Aza-CdR）對肺癌A549細胞株中DNA甲基轉移酶-1（DNMT1）、c-myc、MKi-67和P53基因表達的影響。從而為揭示基因低甲基化或去甲基化與肺癌的發(fā)生發(fā)展關系機制奠定理論基礎。
　　方法：實驗組為甲基化抑制劑5-Aza-CdR處理的肺癌A549細胞株細胞，對照組為不加藥的肺癌A549細胞株細胞；藥物處理72小時后，采用熒

2、光定量聚合酶鏈式反應(FQ-PCR)技術檢測A549細胞株細胞中DNMT1，c-myc，MKi-67及P53基因mRNA的表達，蛋白質印跡方法（Western blot）檢測DNMT1，c-myc，MKi-67及P53蛋白的表達。
　　結果：⑴甲基化抑制劑5-Aza-CdR處理肺癌A549細胞株細胞后，與對照組相比較，實驗組肺癌A549細胞生長明顯受到抑制；⑵FQ-PCR結果顯示：實驗組DNMT1、c-myc和MKi-67mRNA

3、的表達量（0.35±0.02、0.33±0.03、0.29±0.01）明顯低于對照組（1.04±0.06、1.02±0.03、0.98±0.03），而實驗組中P53mRNA表達量明顯高于對照組（1.59±0.04比0.89±0.09），兩組比較均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；⑶Western blot結果顯示：實驗組DNMT1、c-myc和MKi-67蛋白的表達量（0.43±0.03、0.45±0.05、0.33±0.03）明顯低于對照

4、組（1.21±0.06、1.31±0.12、0.51±0.09），而實驗組中P53蛋白表達量明顯高于對照組（1.92±0.05比0.70±0.02），兩組比較均有統(tǒng)計學意義。
　　結論：①甲基化抑制劑5-Aza-CdR可使體外培養(yǎng)的肺癌A549細胞生長受到抑制；②甲基化抑制劑5-Aza-CdR可使肺癌A549細胞中DNMT1、c-myc、MKi-67基因表達降低，P53基因表達增高，這可能與基因啟動子區(qū)域出現(xiàn)的去甲基化有關，可為去