tBHQ對(duì)2型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜VEGF及Bcl-2表達(dá)的影響及保護(hù)作用.pdf

1、目的：采用高脂高糖飲食聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozocin，STZ)建立2型糖尿病大鼠模型，觀察叔丁基對(duì)苯二酚(tert-Butyl Hydroquinone，tBHQ)對(duì)2型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)及B細(xì)胞白血病/淋巴瘤2(B-cell leukemia/lymphoma-2，Bcl-2)表達(dá)的影響，探討tBHQ通過(guò)Nrf2/ARE信

2、號(hào)通路對(duì)2型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護(hù)作用。
　　方法：50只清潔級(jí)健康雄性成年SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和模型建立組。模型建立組予以高脂高糖飼料喂養(yǎng)4w，空腹12h后以鏈脲佐菌素(streptozocin，STZ)按體質(zhì)量30mg/kg腹腔注射誘導(dǎo)建立2型糖尿病大鼠模型，再選取造模成功大鼠隨機(jī)分為糖尿病組（繼續(xù)喂以高脂高糖飼料），tBHQ干預(yù)組（成模一周后在高脂高糖飼料中添加1％ tBHQ繼續(xù)喂養(yǎng)），4w、12w后觀察3組大鼠的空腹

3、血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、總甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)。放射免疫分析法檢測(cè)空腹血清胰島素(FINs)含量。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中VEGF、Bcl-2的表達(dá)。采用Real-Time qRT-PCR法定量檢測(cè)視網(wǎng)膜組織中Bcl-2，VEGF mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：35只大鼠成功建立2型糖尿病模型，成模率87.5％。各組大鼠FPG比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F分組

4、=78.531，P=0.000)。糖尿病組及tBHQ干預(yù)組的FINs較正常組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F分組=22.480，P=0.000;F時(shí)間=7.636，P=0.008）。糖尿病組的TC、TG較正常對(duì)照組與tBHQ干預(yù)組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（TC:F分組=28.049，P=0.000; TG: F分組=13.108，P=0.000）。糖尿病組及tBHQ干預(yù)組的LDL較正常組明顯增高（F分組=6.804，P＜0.05）。免疫組化

5、結(jié)果顯示:Bcl-2、VEGF蛋白主要表達(dá)于各層視網(wǎng)膜血管、節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)核層、外核層。糖尿病組VEGF蛋白表達(dá)量顯著高于正常組與tBHQ干預(yù)組，不同分組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F分組=11.805，P=0.000)。Bcl-2蛋白在正常組、糖尿病組、tBHQ干預(yù)組的表達(dá)呈遞增趨勢(shì)，且12w的表達(dá)量比4w明顯增高，不同分組及時(shí)間的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F分組=22.943，P=0.000;F時(shí)間=7.170，P=0.08）。Bcl-2在

6、tBHQ干預(yù)組12w的表達(dá)量相較于4w明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-3.013，P=0.004）。Real-TimeqRT-PCR結(jié)果顯示:VEGF mRNA在糖尿病組中的表達(dá)量顯著高于正常組和tBHQ干預(yù)組，不同分組及時(shí)間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F分組=79.220，P=0.000;F時(shí)間=6.090，P＜0.05）;tBHQ干預(yù)組的Bcl-2mRNA表達(dá)量高于糖尿病組和正常組，且糖尿病組的表達(dá)量高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F分組