枸杞多糖對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：觀察枸杞多糖(lyceumbarbarumpolysaccharides,LBP)對(duì)鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病理改變以及對(duì)視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)及閉鎖蛋白(Occludin)表達(dá)的影響,探討枸杞多糖對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護(hù)作用及其機(jī)理。
　　方法：選擇健康成年雄性SD大鼠55只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(CO

2、N組)15只和糖尿病組(DM組)40只。糖尿病組大鼠給予腹腔注射STZ制備糖尿病模型,其中1只大鼠未成模,其余39只成模大鼠再隨機(jī)分為L(zhǎng)BP治療組(LBP組)18只和DM生理鹽水對(duì)照組(Nacl組)21只。LBP組大鼠予以枸杞多糖(160mg/kg/d)每日定時(shí)定量灌胃,Nacl組大鼠同樣每日定時(shí)等量生理鹽水灌胃,直至處死前一天。三組大鼠自給藥后繼續(xù)分別飼養(yǎng)至4周、12周、20周時(shí)給予測(cè)血糖后處死。觀察各組大鼠的一般情況,記錄不同時(shí)期各

3、組大鼠的血糖值。采用HE染色光鏡觀察糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的病理改變,采用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)各組大鼠視網(wǎng)膜VEGF及Occludin的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：1、成功的建立糖尿病大鼠模型。測(cè)各組大鼠血糖,CON組大鼠血糖濃度始終低于6.00mmol/L;在糖尿病大鼠給藥后第4周、第12周、第20周,Nacl組血糖濃度持續(xù)增高,分別為27.1±4.23mmol/L、28.2±5.41mmol/、29.1±6.27mmol/L;而LBP組在

4、同時(shí)間點(diǎn)血糖濃度均明顯低于Nacl組(p<0.01),4周、12周、20周血糖濃度分別為11.8±4.13mmol/L、14.6±3.89mmol/L、15.8±3.99mmol/L。
　　2、糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織學(xué)HE染色檢查顯示,在糖尿病大鼠給藥后第4周、第12周、第20周時(shí),CON組大鼠視網(wǎng)膜始終未見明顯異常變化。第4周時(shí),Nacl組已出現(xiàn)病理損害,LBP組大鼠視網(wǎng)膜未見明顯異常變化。第12周時(shí),Nacl組和LBP組大鼠均出

5、現(xiàn)視網(wǎng)膜病理損害,Nacl組大鼠病變較LBP組重,并且隨病程增加逐漸加重,20周時(shí)其視網(wǎng)膜各層細(xì)胞排列雜亂無章,數(shù)量顯著減少,毛細(xì)血管明顯擴(kuò)張。而LBP組在相同時(shí)間點(diǎn)與Nacl組相比,其視網(wǎng)膜厚度較厚,各層細(xì)胞排列較整齊,細(xì)胞數(shù)量較多,毛細(xì)血管輕度擴(kuò)張,其視網(wǎng)膜病理損傷明顯較Nacl組輕。
　　3、視網(wǎng)膜免疫組織化學(xué)染色觀察:1)VEGF在視網(wǎng)膜的表達(dá):在糖尿病大鼠給藥后第4周、第12周、第20周三個(gè)時(shí)間點(diǎn),CON組大鼠視網(wǎng)膜的V

6、EGF表達(dá)量始終未有明顯變化。Nacl組在第4周時(shí)其表達(dá)量與CON組比較就有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),并隨著病程的發(fā)展,大鼠視網(wǎng)膜VEGF表達(dá)量不斷增高,12周、20周時(shí)其表達(dá)量與CON組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。LBP組大鼠在第4周時(shí)其視網(wǎng)膜的VEGF表達(dá)量與CON組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異
　　(p>0.05),12w時(shí)VEGF表達(dá)量有所增加,與CON組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),并隨著病程的進(jìn)展其表達(dá)量亦有增加,但

7、明顯低于同期Nacl組的表達(dá)量(p<0.01)。
　　2)Occludin在視網(wǎng)膜的表達(dá):在糖尿病大鼠給藥后第4周、第12周、第20周時(shí),CON組大鼠視網(wǎng)膜的Occludin陽性表達(dá)呈黃褐色,表達(dá)量始終未有明顯變化。Nacl組在第4周時(shí)其表達(dá)量與CON組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05),隨著病程的發(fā)展,Occludin表達(dá)量不斷減少,12周、20周時(shí)其表達(dá)量與CON組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。而LBP組大鼠在第4周、第1

8、2周時(shí)其視網(wǎng)膜的ccludin表達(dá)量與CON組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異
　　(p>0.05),20w時(shí)Occludin表達(dá)量才有所減少,與CON組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),但其表達(dá)量仍高于Nacl組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　結(jié)論：LBP可顯著降低糖尿病大鼠血糖濃度,能夠有效的改善視網(wǎng)膜各層組織病理損傷,抑制視網(wǎng)膜VEGF表達(dá)量的增多,阻止視網(wǎng)膜新生血管的形成,并上調(diào)Occludin表達(dá)量,穩(wěn)定視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮的