鴉膽子油交聯(lián)環(huán)糊精包合物的制備及其藥效學考察.pdf

1、鴉膽子油(Brucea javanica oil)是從苦木科植物鴉膽子成熟果實中提取而得的油脂類物質(zhì)。現(xiàn)代藥理學研究表明鴉膽子油具有抗癌、抗病毒、抑菌、抗胃潰瘍、降脂降壓、抑制血栓形成等藥理作用。臨床上使用鴉膽子油乳劑作為輔助抗腫瘤藥物，主要用于治療消化系統(tǒng)腫瘤。但乳劑屬于多相動力學不穩(wěn)定分散體系，在受熱、受冷及長期儲存過程中會引起乳析和破裂，而滲漏的鴉膽子油毒性大，對胃腸粘膜和血管壁的刺激性也很嚴重。因此亟需開發(fā)出良好的鴉膽子油新劑型

2、尤其是口服劑型。本實驗以環(huán)氧氯丙烷(EPI)為交聯(lián)劑制備交聯(lián)環(huán)糊精(CDP)并包合鴉膽子油(BJO)，考察BJO-CDP包合物的口服給藥的安全性和有效性，并與市售鴉膽子油乳劑進行比較，主要實驗內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1 BJO-CDP包合物的制備
　?、僖驭?CD單體為實驗材料，EPI為交聯(lián)劑制備CDP，通過掃描電鏡法、紅外光譜法、核磁共振法以及熔程的改變驗證了CDP的形成。
　?、谕ㄟ^均質(zhì)法制備了鴉膽子油交聯(lián)環(huán)糊精包合

3、物(BJO-CDP)，并采用掃描電鏡法、紅外光譜法、核磁共振法以及熔程的改變對BJO-CDP進行表征，驗證了包合物的形成。
　?、垡曾f膽子苦醇為指標成分，建立HPLC分析包合物中鴉膽子苦醇含量的方法，并進行方法學考察。實驗結(jié)果表明:鴉膽子苦醇濃度(X)與峰面積(Y)線性關系良好，鴉膽子苦醇回歸方程為:Y=1×107X+987534，R2=0.999。鴉膽子苦醇的專屬性、精密度及穩(wěn)定性良好，可用于包合物含量測定。
　　④以包封

4、率為考察指標，采用單因素考察對制備中的主要工藝條件進行篩選，包括CDP與BJO投料比、包合溫度、均質(zhì)時間及稀釋BJO的溶劑量等，以進行正交試驗。
　　⑤以包封率為考察指標，對CDP與BJO的投料比、包合溫度、均質(zhì)時間及溶解BJO的溶劑量四種因素進行正交試驗設計，確定制備包合物的最佳工藝為:CDP與BJO投料比（質(zhì)量比）為10∶1，包合溫度為20℃，均質(zhì)時間為6min，稀釋BJO的溶劑的量為0.5g。
　　2 BJO-CDP包

5、合物的質(zhì)量考察
　?、俑鶕?jù)2015版《中國藥典》凡例項下溶解度測定方法，對BJO-CDP在不同介質(zhì)中的溶解度進行測定，結(jié)果表明:BJO-CDP在蒸餾水、人工胃液及人工腸液中溶解度良好，但在甲醇、乙醇中幾乎不溶。
　?、诓捎蔑@微熔點測定儀，對β-CD、CDP及BJO-CDP包合物的熔程進行測定，結(jié)果表明:β-CD熔程為298～305℃，CDP熔程為271～278℃，BJO-CDP熔程為267～274℃。
　　③在光照、高

6、溫及高濕條件下對BJO-CDP穩(wěn)定性進行考察，結(jié)果表明:BJO-CDP在光照、高溫條件下指標成分鴉膽子苦醇含量未發(fā)生明顯變化，穩(wěn)定性良好;在高濕條件下，包合物吸濕后產(chǎn)生粘稠、結(jié)塊，提示包合物的吸濕性較強，在制備、儲存及運輸過程中應盡量保持密封干燥。
　　3 BJO-CDP包合物的藥效學考察
　?、購镍f膽子油包合物對7721人肝癌細胞的體外抑制試驗結(jié)果可以看出，鴉膽子油包合物的IC50為0.9518 mg/ml，鴉膽子油乳劑的

7、IC50為1.219mg/ml，與市售鴉膽子油乳劑相比，鴉膽子油包合物對7721人肝癌細胞的體外抑制率有所提高。通過流式細胞儀檢測BJO-CDP包合物對細胞凋亡影響的結(jié)果可以看出，隨著藥物濃度增加，包合物能明顯誘導7721細胞凋亡。
　?、趶陌衔飳π∈驝T26結(jié)腸癌細胞移植性腫瘤抑制作用的實驗結(jié)果中可以看出，鴉膽子油交聯(lián)環(huán)糊精包合物中、高劑量組與鴉膽子油乳劑高劑量組對小鼠結(jié)腸癌細胞的生長均有顯著抑制作用(p＜0.05)，抑瘤率分

8、別為23.86％、42.61％、35.91％，且鴉膽子油交聯(lián)環(huán)糊精包合物高劑量組對小鼠的體重影響較同劑量的鴉膽子油乳劑要小，說明鴉膽子油被制成交聯(lián)環(huán)糊精包合物后體內(nèi)抑癌效率提高，且毒性降低。
　　③從急性毒性試驗結(jié)果可以看出，鴉膽子油交聯(lián)環(huán)糊精包合物的安全性顯著高于市售鴉膽子油乳劑。BJO-CDP包合物的LD50未能測出，市售鴉膽子油乳劑的LD50為9.780g/kg。
　　本實驗成功制備BJO-CDP包合物，并對其制備工藝