溫敏性藥物-β-環(huán)糊精包合物的制備及性能研究.pdf

1、聚(N-異丙基丙烯酰胺)(PNIPA)是一種具有溫度敏感性的聚合物，其水溶液在常溫下澄清透明，當(dāng)溫度升高到其低臨界溶液溫度(LCST)(～32℃)以上時(shí)發(fā)生相分離，溶液變?yōu)闇啙岵?huì)產(chǎn)生沉淀。β-環(huán)糊精(β-cyclodextrin，β-CD)可以與疏水性藥物形成包合物，增加難溶性藥物的溶解度，提高生物利用度。本課題利用PNIPA與β-環(huán)糊精的特點(diǎn)，將兩者結(jié)合起來，形成一個(gè)新型的溫敏性給藥載體，使該給藥載體既具有溫度敏感性，又具有藥物包合

2、能力。利用載體溶液在常溫下為流動(dòng)性溶液，體溫下條件下產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)，該載體可以用作無創(chuàng)傷性皮下植入劑的材料。 PNIPA是由N-異丙基丙烯酰胺(N-isopropylacrylamide)為單體，偶氮二異丁腈為引發(fā)劑，巰基乙酸為鏈轉(zhuǎn)移劑，通過自由基聚合而成。PNIPA的分子量可以通過巰基乙酸的含量來控制，同時(shí)加入巰基乙酸可以在PNIPA末端引入功能性羧基，以便下一步反應(yīng)。在聚合過程中加入不同親疏水單體可以提高或者降低共聚物的LC

3、ST，親水性單體可以提高共聚物的LCST；反之，疏水性單體可以降低共聚物的LCST。本實(shí)驗(yàn)合成了分子量分別為1813、3995和8306的PNIPA均聚物，并合成了LCST在25.7℃和37.9℃的PNIPA共聚物。用對甲苯磺酰氯選擇性活化β-CD的羥基，再與乙二胺反應(yīng)合成帶胺基的β-CD，末端帶羧基的PNIPA在水溶性縮合劑1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺(EDC)的作用與帶胺基的β-CD縮合，合成酰胺鍵連接的PNIPA-

4、β-CD。此外還考察了另外合成PNIPA-β-CD的方法。采用紅外、1H-NMR等方法表征了PNIPA-β-CD的結(jié)構(gòu)；用紫外可見分光光度法、粒徑分析儀、透射電鏡等方法考察了PNIPA-β-CD的溫敏性，PNIPA-β-CD在0.05M、0.1M和0.2M磷酸鹽緩沖溶液中的LCST分別為26.8℃、22.4℃和20.0℃，在pH為2.2、4.0和6.0緩沖液中的LCST分別為27.5℃、29.7℃和31.5℃。 本實(shí)驗(yàn)選用了三種

5、模型藥物吲哚美辛、二氟尼柳、醋酸甲羥孕酮來考察PNIPA-β-CD對藥物的包合能力，并分別考察了溶劑揮發(fā)法、研磨法、透析法這三種不同的包合方法對載藥量的影響。其中研磨法制備的包合物的載藥量均不高。采用溶劑揮發(fā)法制備的包合物的載藥量均比較高，分別達(dá)到了3.29﹪、3.04﹪和0.86﹪。對吲哚美辛而言，用乙醇為溶劑的透析法制備的包合物的載藥量最高，達(dá)到了4.06﹪，產(chǎn)率達(dá)到92.4﹪。因此，PNIPA-β-CD可以有效的將疏水性藥物包合進(jìn)

6、入環(huán)糊精空腔，提高疏水性藥物的溶解度。 本課題著重考察了吲哚美辛/PNIPA-β-CD包合物的體外釋藥行為，由于PNIPA-β-CD在不同介質(zhì)中的LCST不同，吲哚美辛/PNIPA-β-CD在不同pH和不同離子強(qiáng)度緩沖液中的釋藥行為也不同，PNIPA-β-CD分子量對吲哚美辛/PNIPA-β-CD的釋藥也有一定的影響。選用25℃和37℃兩點(diǎn)溫度來考察溫度對藥物釋放的影響，結(jié)果表明，當(dāng)PNIPA-β-CD在介質(zhì)中的LCST＜25℃

7、時(shí)，在這兩點(diǎn)溫度的藥物釋放行為相近，當(dāng)PNIPA-β-CD在介質(zhì)中的LCST＞25℃時(shí)，由于PNIPA-β-CD在25℃和37℃中的溶液狀態(tài)不一樣，釋放行為也不一樣，37℃的釋藥速率比25℃的慢。 大鼠為實(shí)驗(yàn)對象，進(jìn)行皮下注射給藥，考察了吲哚美辛/PNIPA-β-CD的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為。血漿樣品經(jīng)處理后用HPLC法測定藥物濃度，采用DAS藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。HPLC的色譜條件為色譜柱C18柱(5

8、μm，4.6·150mm)，流動(dòng)相：乙腈-6nM磷酸水溶液(55：45，v：v)，流速：2ml/min，柱溫：40℃，檢測波長：245nm，進(jìn)樣體積：20μl，內(nèi)標(biāo)為甲滅酸。吲哚美辛與血漿內(nèi)源性成分在上述色譜條件下能有效分離，吲哚美辛與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的保留時(shí)間分別為6.749min和10.644min，分離良好。該方法回收率與精密度均符合要求，表明該方法準(zhǔn)確，可行。不同劑量組的吲哚美辛/PNIPA-β-CD包合物經(jīng)大鼠皮下給藥后，血樣經(jīng)處理和

9、測定，血藥數(shù)據(jù)擬合后符合一室模型。相同劑量的吲哚美辛/β-CD與吲哚美辛/PNIPA-β-CD包合物溶液大鼠皮下注射后，AUC與Cmax無顯著性差異，但是吲哚美辛/PNIPA-β-CD包合物的t1/2(a)與Tmax均比吲哚美辛/β-CD包合物大。相同劑量的吲哚美辛/PBS溶液與吲哚美辛/PNIPA-β-CD包合物大鼠皮下注射后，AUC與Cmax有顯著性差異，吲哚美辛PNIPA-β-CD包合物的AUC、t1/2(a)、Tmax均比吲哚美