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文檔簡介
1、目的：分析并探討MUC1在黑色素瘤轉(zhuǎn)移過程中的作用及其分子機制。 2、> 結(jié)果：轉(zhuǎn)移性黑色素瘤細胞系中 MUC1基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平都顯著升高，黑色素瘤細胞B16和B16BL6在MUC1沉默時運動能力減弱，過表達MUC1促進其遷移。當MUC1過表達，黑色素瘤細胞中只有AKT被顯著激活；當MUC1被沉默，AKT激活水平被下調(diào)。在沉默MUC1的B16和B16BL6細胞中，活化的AKT很大程度恢復了受損的細胞遷移能力，封閉AKT信號通路抑制MUC1介導的黑色素瘤細胞遷移。敲減MUC1抑制小鼠黑色素瘤細胞轉(zhuǎn)移，
方法：首先通過培養(yǎng)黑色素瘤系細胞和人表皮黑色素細胞，然后構(gòu)建載體。通過細胞劃痕試驗和細胞遷移試驗，檢測細胞的運動和遷移能力。再利用實時熒光定量PCR和Western Blot分別比較MUC1的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平。利用細胞免疫熒光法測定沉默和過表達MUC1對AKT表達造成的效應。并通過體內(nèi)實驗中小鼠肺轉(zhuǎn)移灶的數(shù)量對比，進一步驗證MUC1對黑色素瘤細胞轉(zhuǎn)移的作用。
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