MUC1對(duì)黑色素瘤細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移的作用及其分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：分析并探討MUC1在黑色素瘤轉(zhuǎn)移過程中的作用及其分子機(jī)制。
　　方法：首先通過培養(yǎng)黑色素瘤系細(xì)胞和人表皮黑色素細(xì)胞，然后構(gòu)建載體。通過細(xì)胞劃痕試驗(yàn)和細(xì)胞遷移試驗(yàn)，檢測(cè)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和遷移能力。再利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western Blot分別比較MUC1的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平。利用細(xì)胞免疫熒光法測(cè)定沉默和過表達(dá)MUC1對(duì)AKT表達(dá)造成的效應(yīng)。并通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中小鼠肺轉(zhuǎn)移灶的數(shù)量對(duì)比，進(jìn)一步驗(yàn)證MUC1對(duì)黑色素瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用。

2、>　　結(jié)果：轉(zhuǎn)移性黑色素瘤細(xì)胞系中 MUC1基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平都顯著升高，黑色素瘤細(xì)胞B16和B16BL6在MUC1沉默時(shí)運(yùn)動(dòng)能力減弱，過表達(dá)MUC1促進(jìn)其遷移。當(dāng)MUC1過表達(dá)，黑色素瘤細(xì)胞中只有AKT被顯著激活；當(dāng)MUC1被沉默，AKT激活水平被下調(diào)。在沉默MUC1的B16和B16BL6細(xì)胞中，活化的AKT很大程度恢復(fù)了受損的細(xì)胞遷移能力，封閉AKT信號(hào)通路抑制MUC1介導(dǎo)的黑色素瘤細(xì)胞遷移。敲減MUC1抑制小鼠黑色素瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移，