腸炎沙門氏菌熱損傷修復方法研究及其rpoH基因的敲除.pdf

1、腸炎沙門氏菌(Salmonella enteritidis)，極易污染肉類、魚類、禽肉類、奶類、蛋類食品，是引起食物中毒最常見的病原菌之一。我國現行的食品衛(wèi)生微生物學檢驗標準：沙門氏菌檢驗(GB/T4789.4-2003)規(guī)定，加工過的食品的沙門氏菌檢驗使用緩沖蛋白胨水作為修復介質、常采用選擇性培養(yǎng)基DHL(膽硫乳瓊脂)對沙門氏菌進行檢測。巴氏滅菌等中低溫滅菌食品中可能存在亞致死狀態(tài)的腸炎沙門氏菌，易引起漏檢和假陰性結果，不能正確反映食

2、品衛(wèi)生狀況。本文通過比較不同的修復介質、溫度、時間，考察亞致死狀態(tài)腸炎沙門氏菌的修復條件，使腸炎沙門氏菌檢測結果更能真實、準確的反映食品衛(wèi)生狀況，對現有的標準方法給予補充。 為了進一步了解沙門氏菌的熱激亞致死和損傷的修復機制，為亞致死狀態(tài)沙門氏菌的檢測方法提供理論依據，進行了腸炎沙門氏菌編碼熱休克轉錄因子σ32的rpoH基因的功能探索研究。利用Red重組系統(tǒng)對Salmonella enteritidisIFO3313的rpoH基

3、因進行缺失突變，構建腸炎沙門氏菌Salmonella enteritidisIFO3313株的rpoH基因缺陷株IFO3313-△rpoH，并使用PCR方法對其進行驗證，在此基礎上使用不同培養(yǎng)基對缺陷株與野生株進行不同溫度下的熱激應答結果和亞致死熱損傷修復能力的考察，比較不同溫度下缺陷株與野生株的熱激響應特性，探討rpoH基因的缺失對腸炎沙門氏菌的熱激響應的影響，對亞致死狀態(tài)食源性病原微生物的檢測做出初步研究。結果表明： (1)