腸炎沙門氏菌熱損傷修復(fù)方法研究及其rpoH基因的敲除.pdf

1、腸炎沙門氏菌(Salmonella enteritidis)，極易污染肉類、魚類、禽肉類、奶類、蛋類食品，是引起食物中毒最常見的病原菌之一。我國現(xiàn)行的食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗標準：沙門氏菌檢驗(GB/T4789.4-2003)規(guī)定，加工過的食品的沙門氏菌檢驗使用緩沖蛋白胨水作為修復(fù)介質(zhì)、常采用選擇性培養(yǎng)基DHL(膽硫乳瓊脂)對沙門氏菌進行檢測。巴氏滅菌等中低溫滅菌食品中可能存在亞致死狀態(tài)的腸炎沙門氏菌，易引起漏檢和假陰性結(jié)果，不能正確反映食

2、品衛(wèi)生狀況。本文通過比較不同的修復(fù)介質(zhì)、溫度、時間，考察亞致死狀態(tài)腸炎沙門氏菌的修復(fù)條件，使腸炎沙門氏菌檢測結(jié)果更能真實、準確的反映食品衛(wèi)生狀況，對現(xiàn)有的標準方法給予補充。 為了進一步了解沙門氏菌的熱激亞致死和損傷的修復(fù)機制，為亞致死狀態(tài)沙門氏菌的檢測方法提供理論依據(jù)，進行了腸炎沙門氏菌編碼熱休克轉(zhuǎn)錄因子σ32的rpoH基因的功能探索研究。利用Red重組系統(tǒng)對Salmonella enteritidisIFO3313的rpoH基

3、因進行缺失突變，構(gòu)建腸炎沙門氏菌Salmonella enteritidisIFO3313株的rpoH基因缺陷株IFO3313-△rpoH，并使用PCR方法對其進行驗證，在此基礎(chǔ)上使用不同培養(yǎng)基對缺陷株與野生株進行不同溫度下的熱激應(yīng)答結(jié)果和亞致死熱損傷修復(fù)能力的考察，比較不同溫度下缺陷株與野生株的熱激響應(yīng)特性，探討rpoH基因的缺失對腸炎沙門氏菌的熱激響應(yīng)的影響，對亞致死狀態(tài)食源性病原微生物的檢測做出初步研究。結(jié)果表明： (1)