HIMF調(diào)控PI3K-Akt-mTOR通路對大鼠低氧性肺動脈高壓的影響.pdf

1、目的：觀察不同低氧時間大鼠肺組織中低氧誘導(dǎo)促有絲分裂因子（HIMF）的表達(dá)情況，干預(yù)大鼠肺組織中HIMF的表達(dá)，探討其對大鼠肺血管重塑及肺動脈高壓形成的影響。
　　方法：（1）以低氧復(fù)制大鼠肺動脈高壓動物模型，Western-blot、q-PCR、免疫組化等檢測不同低氧時間（0、3、7、14、21天）肺組織、肺泡灌洗液及血清中HIMF的表達(dá)；（2）慢病毒介導(dǎo)siRNA干擾低氧大鼠肺組織內(nèi)HIMF的表達(dá)，Western-blot、免

2、疫組化等檢測其在肺組織、肺泡灌洗液及血清中HIMF表達(dá)情況，并觀察大鼠肺血管重塑情況；（3）鼠重組HIMF蛋白增強(qiáng)常氧大鼠肺組織內(nèi)HIMF的表達(dá)，Western-blot、免疫組化等檢測其在肺組織內(nèi)表達(dá)情況，并觀察大鼠肺血管重塑情況；（4）免疫組化檢測干預(yù)HIMF表達(dá)后大鼠肺動脈壁PI3K/Akt/mTOR的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：（1）HIMF在肺組織、肺泡灌洗液、血清中隨不同低氧時間而表達(dá)變化，其蛋白及mRNA均在3天時表達(dá)達(dá)到

3、高峰，后逐漸下降，至21天仍高于正常表達(dá)(P＜0.05)；（2）低氧時HIMF在肺組織內(nèi)主要表達(dá)于支氣管、肺泡上皮細(xì)胞，血管平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及炎癥相關(guān)細(xì)胞；（3）慢病毒介導(dǎo)siRNA干擾HIMF在大鼠肺組織內(nèi)的表達(dá)后，其表達(dá)水平下降，較對照組有顯著差異（P＜0.05）， 低氧大鼠肺血管重塑情況較對照組減輕（P＜0.05）；（4）鼠重組HIMF蛋白增強(qiáng)HIMF在大鼠肺組織內(nèi)的表達(dá)后，其表達(dá)水平明顯上升，較對照組有顯著差異

4、（P＜0.05），常氧大鼠肺血管重塑情況較對照組加重，低氧大鼠肺血管重塑較之進(jìn)一步加重，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；（5）免疫組化提示過表達(dá)HIMF后肺動脈壁PI3K、Akt、mTOR表達(dá)上升，反之則下降。
　　結(jié)論：（1）低氧能促進(jìn)大鼠肺組織內(nèi)HIMF的表達(dá)，主要分布于肺泡上皮、支氣管上皮及平滑肌、血管內(nèi)皮及平滑肌、纖維細(xì)胞、少量炎癥細(xì)胞內(nèi)。（2）干預(yù)大鼠肺內(nèi)HIMF的表達(dá)能部分減少低氧誘導(dǎo)或促進(jìn)肺血管重塑及肺動脈高壓的