谷氨酸能和GABA能神經(jīng)元突觸前差異研究.pdf

1、由于興奮性和抑制性突觸對(duì)于神經(jīng)環(huán)路調(diào)節(jié)的重要性，谷氨酸能和GABA能突觸的功能研究一直是關(guān)注的熱點(diǎn)。以往的研究往往關(guān)注于兩者突觸后的差別，而突觸前的研究則大部分不區(qū)分二者或僅僅集中于谷氨酸能突觸。
　　我們的研究首先利用了高壓冷凍固定技術(shù)對(duì)小鼠大腦皮層組織的興奮性突觸和抑制性突觸囊泡結(jié)構(gòu)形態(tài)進(jìn)行了3D重構(gòu)和大小與形態(tài)的比較，發(fā)現(xiàn)在抑制性的GABA能突觸中能夠觀察到較多直徑在60nm以上的囊泡，而興奮性突觸的囊泡則幾乎都集中在50n

2、m附近;接著，我們利用辣根過氧化物酶（HRP）對(duì)谷氨酸能突觸和GABA能突觸前的功能性回收囊泡進(jìn)行標(biāo)記，并在標(biāo)記后的不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行固定和觀察，發(fā)現(xiàn)GABA能突觸的功能性回收囊泡中有大量直徑接近內(nèi)吞體(endosome)的大型囊泡，這些大型囊泡在回收后15min內(nèi)可以轉(zhuǎn)變生成小囊泡，而谷氨酸能突觸中這一現(xiàn)象并不明顯;之后，我們又利用FM4-64染料標(biāo)記回收囊泡，并于15min后在熒光顯微鏡下對(duì)神經(jīng)元進(jìn)行刺激和實(shí)時(shí)成像。我們發(fā)現(xiàn)，GABA能