TRB3介導(dǎo)高血壓心臟重構(gòu)的作用和機(jī)制.pdf

1、以心肌肥厚和心臟纖維化為特征的心臟異常重構(gòu)是高血壓心臟病的核心病理改變，是造成慢性心力衰竭的主要原因。心肌肥厚是指心臟在遺傳、環(huán)境或生理病理因素作用下，為了適應(yīng)心臟泵血做功增加而出現(xiàn)的心臟重量和體積增加，它不僅包含心肌細(xì)胞的肥大，而且伴有心臟間質(zhì)的改變。TRB3作為T(mén)ribbles家族成員之一，參與包括器官纖維化、癌癥及心血管等多種疾病的發(fā)生和發(fā)展并調(diào)節(jié)代謝、細(xì)胞分化、凋亡、應(yīng)激和膠原表達(dá)等生理過(guò)程。新近研究證明，抑制TRB3可改善小鼠

2、心肌病癥狀，降低心肌纖維化與脂質(zhì)浸潤(rùn)，下調(diào)炎癥水平。我們前期發(fā)現(xiàn)TRB3在肥厚心肌細(xì)胞以及心肌浸潤(rùn)細(xì)胞中高表達(dá)?；谝陨侠碚摵脱芯拷Y(jié)果，本文進(jìn)一步對(duì)TRB3是否能夠介導(dǎo)高血壓心肌重構(gòu)及可能的機(jī)制進(jìn)行了探討。具體內(nèi)容主要分為以下兩部分:
　　1.TRB3介導(dǎo)高血壓心肌重構(gòu)的作用機(jī)制。
　　我們采用了腹主動(dòng)脈狹窄(AAC)誘導(dǎo)的高血壓性心肌肥厚模型進(jìn)行試驗(yàn)和驗(yàn)證，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，壓力負(fù)荷型心肌肥厚小鼠心臟中高表達(dá)TRB3，干擾TRB3

3、后可以改善心肌肥厚以及心臟纖維化程度。此外，我們還發(fā)現(xiàn)心臟過(guò)表達(dá)TRB3后上調(diào)心肌P53含量，且大量表達(dá)的P53主要分布于胞漿，干擾TRB3后P53的含量也隨之降低。說(shuō)明胞漿中的P53與TRB3的關(guān)系密切，提示TRB3可能與P53之間存在相百作用。激光共聚焦實(shí)驗(yàn)和免疫共沉淀的方法證實(shí)在心肌組織內(nèi)TRB3與P53存在蛋白質(zhì)的相互作用，且P53和TRB3的C端和KD端結(jié)構(gòu)域有明顯的相互作用。胞外的P53的一個(gè)重要的生理功能就是參與調(diào)節(jié)線粒體

4、自噬特異性通路，保持細(xì)胞氧化應(yīng)激信號(hào)穩(wěn)態(tài)，由此我們推測(cè)TRB3通過(guò)上調(diào)胞漿中P53的含量進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞線粒體自噬?；谝陨霞僬f(shuō)，我們檢測(cè)了心肌原代細(xì)胞過(guò)表達(dá)TRB3后線粒體自噬的變化情況。我們發(fā)現(xiàn)當(dāng)心肌細(xì)胞過(guò)表達(dá)TRB3后，LC3和Tom20在細(xì)胞中的共聚積現(xiàn)象減弱，并且TRB3后可通過(guò)Nix途徑抑制線粒體自噬，并引發(fā)心肌組織內(nèi)線粒體氧化損傷。
　　2.阻斷TRB3/p62相互作用防治高血壓心肌肥厚。
　　實(shí)驗(yàn)室前期發(fā)現(xiàn)TRB

5、3可與自噬過(guò)程中重要的“貨車蛋白”P(pán)62結(jié)合，并且通過(guò)干擾P62的降解引發(fā)多種細(xì)胞的功能紊亂。針對(duì)TRB3這一靶點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了多肽Pep2-A2，該多肽可以有效干擾TRB3與P62相互作用，同時(shí)也可有效地降低細(xì)胞內(nèi)TRB3和P62的表達(dá)。為了驗(yàn)證多肽Pep2-A2對(duì)心肌肥厚的治療作用我們利用腹主動(dòng)脈狹窄誘導(dǎo)的壓力負(fù)荷型心肌肥厚小鼠模型對(duì)其藥效學(xué)進(jìn)行探討。我們發(fā)現(xiàn)壓力負(fù)荷型心肌肥厚小鼠心臟出現(xiàn)明顯的心肌肥厚病理特征并伴隨著IL-6、IL