腦利鈉肽對阿霉素體外誘導新生大鼠心肌細胞凋亡的影響.pdf

1、[目的]
　　 心肌細胞凋亡是心力衰竭的主要原因,腦利鈉肽(BNP)水平可反映心衰的嚴重程度,BNP和心肌細胞凋亡之間的關系的認識不足限制了BNP的臨床應用。本研究利用阿霉素(ADR)致心肌細胞凋亡模型,探討B(tài)NP對大鼠心肌細胞凋亡的影響,為進一步認識臨床應用BNP治療心力衰竭的安全性提供基礎研究數(shù)據(jù)。
　　 [方法]
　　 1.乳鼠心肌細胞原代培養(yǎng)4d。
　　 2.實驗分組:Control組:心肌細胞未

2、加藥物處理。ADR組:心肌細胞以5mg/LADR進行處理。BNP組:心肌細胞以0.1μmol/L BNP進行處理。BNP+ADR組:心肌細胞分別以0.01μmol/L BNP+5mg/LADR、0.1μmol/LBNP+5mg/L ADR、11μmol/L BNP+5mg/L ADR進行處理。
　　 3.以CCK-8法測定心肌細胞存活率
　　 4.流式細胞儀檢測心肌細胞凋亡百分比,熒光顯微鏡觀察凋亡心肌細胞。
　　

3、 5.以caspase-3檢測試劑盒測定心肌細胞caspasc-3酶活性,用Bradford法測定總蛋白,計算出每毫克蛋白樣品中caspase-3酶活力單位。
　　 [結果]
　　 1.BNP能明顯降低大鼠心肌細胞的存活率,與Control組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01),且與ADR有協(xié)同作用。其中1μmol/L BNP+ADR組的細胞存活率明顯低于0.01μmol/L BNP+ADR組及0.1μmol/L BN

4、P+ADR組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　 2.BNP能增強大鼠心肌細胞中caspase-3酶活力,與Control組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。且與ADR有協(xié)同作用,三組不同濃度的BNP+ADR組劑量依賴性地進一步增強caspase-3酶活力,和ADR組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　 3.BNP能誘導大鼠心肌細胞的凋亡,與Control組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01),且與A

5、DR有協(xié)同作用,三組不同濃度BNP+ADR組劑量依賴性地增加心肌細胞凋亡,與ADR組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　 [結論]
　　 1.BNP能降低大鼠心肌細胞存活率,在0.01～1μmol/L范圍內(nèi)劑量依賴性地降低ADR作用下心肌細胞的存活率。
　　 2.BNP能增強大鼠心肌細胞中caspase-3酶活力,在0.01～1μmol/L范圍內(nèi)劑量依賴性地增強ADR作用下心肌細胞內(nèi)caspase-3酶