p38-MAPK和STAT3信號(hào)通路介導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療急性肝功能衰竭作用研究.pdf

1、目的:1、明確骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells，BMSCs）通過分泌細(xì)胞因子調(diào)節(jié)急性肝功能衰竭(Acute liver failure)體內(nèi)的炎癥微環(huán)境，抑制了炎癥的發(fā)生發(fā)展，IL-10在其中起關(guān)鍵作用。
　　2、明確IL-10通過p38/MAPK和STAT3信號(hào)通實(shí)現(xiàn)抑制急性肝功能衰竭體內(nèi)的炎癥反應(yīng)，從而治療急性肝功能衰竭的目的。
　　方法:實(shí)驗(yàn)分為兩部分。第一部分比較

2、對(duì)照組、ALF組、BMSCs治療組、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基(MSC-CM)治療組、rmIL-10治療組、抗IL-10抗體(anti-IL-10 ab)組六組大鼠的一般臨床表現(xiàn)、生存率、肝功能指標(biāo)、血清炎癥因子水平、肝臟組織病理學(xué)情況來評(píng)估大鼠ALF的狀況。并使用蛋白芯片分析MSC-CM中細(xì)胞因子的分泌情況。通過以上方法來研究BMSCs的旁分泌治療作用，以及IL-10對(duì)于ALF中炎癥的緩解情況。第二部分，通過western blot檢

3、測(cè)對(duì)照組、ALF組、rm IL-10治療組中P38/MAPK、STAT3以及各自磷酸化水平的變化。并探究分別抑制兩種通路之后，大鼠一般臨床表現(xiàn)、生存情況、肝功能指標(biāo)、炎癥因子水平及肝臟組織病理學(xué)改變情況。通過以上方法來研究P38/MAPK以及STAT3信號(hào)通路在IL-10抑制炎癥反應(yīng)中的作用。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)第一部分結(jié)果表明BMSCs治療組、MSC-CM治療組、rm IL-10治療組相對(duì)于ALF組具有緩解肝衰竭炎癥，顯著降低促炎因

4、子水平，增高抑炎因子IL-10水平從而促進(jìn)肝細(xì)胞增殖、降低肝細(xì)胞凋亡，促進(jìn)肝細(xì)胞功能恢復(fù)，顯著降低轉(zhuǎn)氨酶以及總膽紅素水平的作用，降低了死亡率(p＜0.05)。Anti-IL-10ab組明顯逆轉(zhuǎn)了rm IL-10的治療作用。蛋白芯片檢測(cè)BMSCs條件培養(yǎng)基中抑炎因子IL-10表達(dá)最高。第二部分Western blot顯示ALF組中，P38/MAPK水平異常增高，STAT3水平降低;il-10組中P38/MAPK磷酸化水平明顯被抑制，STA

5、T3磷酸化水平增高。抑制了P38/MAPK能明顯逆轉(zhuǎn)急性肝功能衰竭各種表現(xiàn)，抑制了炎癥反應(yīng)，表明IL-10通過抑制了p38/MAPK通路達(dá)到治療目的。而抑制了STAT3的活性之后，IL-10的治療作用被逆轉(zhuǎn)，辨明IL-10通過激活STAT3通路來達(dá)到治療效果。
　　結(jié)論:1、調(diào)節(jié)炎癥微環(huán)境是BMSCs移植治療急性肝衰竭的主要作用方式。IL-10為其關(guān)鍵因子。
　　2、IL-10通過抑制P38/MAPK通路以及激活STAT3通