低血壓腦死亡大動物模型的建立及其供肝損傷機制研究.pdf

1、目的:腦死亡供體已為當前器官移植領域重要供體來源，國外大部分供體均來自腦死亡，國內由于受傳統(tǒng)觀念及整體醫(yī)療水平限制，腦死亡供體較少而且多屬于血流動力學不穩(wěn)定，存在一定時間低血壓的不可控型。就腦死亡供體本身而言，會導致機體產生系列病理生理學的變化，從而損害供體器官質量，尤其是循環(huán)不穩(wěn)定、存在較長時間低血壓的供體，其機制較復雜，尚未完全闡明。為明確低血壓對腦死亡供體肝臟的損害程度及其機制，本研究擬建立低血壓腦死亡供肝大動物模型，從全身及供肝

2、局部血流動力學變化、肝功能變化、肝組織病理改變及炎癥因子變化進行深入研究。
　　方法:選用16只巴馬小型豬，采用改良的緩慢勻速顱內水囊加壓法建立豬腦死亡模型，取顱骨中線處鉆孔，于硬膜外置入Foley水囊注水加壓，通過升高顱內壓使腦組織缺血缺氧從而進行誘導腦死亡，并間隔12h進行腦死亡確認。本研究通過密切監(jiān)測腦死亡維護期間的整體血流動力學變化，肝動脈及門靜脈血流量變化，并通過血液生化學指標，肝臟病理及電鏡，供肝標本分子生物學檢測等方

3、法明確腦死亡狀態(tài)下低血壓對供肝質量的影響，并探討其內在損傷機制。
　　結果:①16只豬中14頭成功建立腦死亡模型，給予呼吸及循環(huán)支持后，8只成功維持12h;②隨著腦死亡時間延長，實驗動物心率逐漸升高，并出現(xiàn)較大幅度的波動;平均動脈壓(MAP)逐漸降低，門靜脈及肝動脈血流逐漸下降，膽汁量及尿量逐漸減少，各時間點間有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);⑨血清谷丙轉氨酶(AST)及乳酸脫氫酶(LDH)出現(xiàn)逐漸升高，各時間點間有統(tǒng)計學差異(P＜0

4、.05);④肝組織HE染色提示:腦死亡3小時(h)以內肝結構基本正常，可逆性改變，3h以后肝細胞水腫逐漸加重，擠壓肝竇導致微循環(huán)障礙，肝細胞進一步缺氧，微泡性變性加重;隨時間延長5h以后大泡性脂肪變性提示慢性缺血性損傷，7h以后肝細胞出現(xiàn)凋亡，并出現(xiàn)氣球樣變性，提示肝細胞不可逆性損傷。⑤腦死亡后隨著時間延長，腸源性內毒素釋放明顯增加;⑥與開腹后相比，腦死亡后3h、腦死亡后6h及腦死亡后12h，肝組織腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白細胞

5、介素-1β(IL-1β)、P-選擇素(P-Selectin)及內皮素-1(ET-1)水平逐漸升高，各時間點具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)及一氧化氮(NO)水平逐漸下降，各時間點具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);干擾素-γ（IFN-γ）表達于3h升高，其后逐漸下降，肝組織三磷酸腺苷(ATP)含量變化呈現(xiàn)波動趨勢。
　　結論:①改良的緩慢勻速顱內水囊加壓法可以成功地建立低血壓豬腦死亡模型;②血流動力學