蛭龍活血通瘀膠囊拆方對腎血管性高血壓大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌功能的干預(yù)研究.pdf

1、目的：通過對蛭龍活血通瘀膠囊拆方觀察對腎血管性高血壓大鼠血壓、血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌功能、炎癥反應(yīng)等的影響，探討全方及其拆方降壓的作用機(jī)制，為益氣活血通絡(luò)法治療高血壓病提供理論依據(jù)。
　　方法：將110只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組（12只）、假手術(shù)組(12只)、手術(shù)組（86只），手術(shù)組縮窄左腎動脈，構(gòu)建二腎一夾(2K1C)型腎血管性高血壓大鼠(RVR)模型。篩選模型成功大鼠60只，隨機(jī)分為模型組、卡托普利組、拆方Ⅰ組（補(bǔ)氣組）、拆方Ⅱ組

2、（活血化瘀組）、拆方Ⅲ組（溫經(jīng)通絡(luò)組）、全方組各10只，分別給予相應(yīng)藥物1次/日灌服，并以相同體積生理鹽水灌胃正常組、假手術(shù)組、模型組。采用尾動脈搏動法測量大鼠基礎(chǔ)血壓、手術(shù)后2周、手術(shù)后6周、治療2周末及治療4周末血壓。灌胃4周后，大鼠腹主動脈采血，制備血清。采用硝酸還原酶法測定血清一氧化氮(NO)濃度，放射免疫法測定血清C反應(yīng)蛋白(CRP)濃度，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、內(nèi)皮素-1(ET-1)濃度

3、。取大鼠胸主動脈，一部分免疫組化法(SABC)檢測血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)的陽性表達(dá);另一部分行HE染色，于光鏡下對胸主動脈進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察并測量中膜厚度。
　　結(jié)果：⑴對各組大鼠一般情況觀察:正常組及假手術(shù)組大鼠營養(yǎng)狀況良好，毛色潔凈富有光澤，飲食正常，性情溫和，行動敏捷。模型組大鼠毛色逐漸變黃變硬失去光澤，飲水量增加，形體偏瘦，反應(yīng)遲鈍。拆方Ⅲ組于灌胃1周后出現(xiàn)毛色變黃，煩躁易激，有2只大鼠雙眼結(jié)膜顏色變紅。其余各組均于

4、治療后毛色逐漸恢復(fù)光澤，性情溫順。⑵藥物對腎血管性高血壓大鼠血壓的影響：術(shù)前血壓:各組大鼠血壓值差異無統(tǒng)計學(xué)意義；術(shù)后2周末及6周末血壓:模型組、卡托普利組、拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組、拆方Ⅲ組、全方組血壓較術(shù)前明顯升高，與假手術(shù)組、正常組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)；灌藥2周末血壓:正常組、假手術(shù)組、模型組血壓較灌服生理鹽水前基本無變化;與模型組比較，卡托普利組、拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組、全方組血壓有下降(P＜0.05），而模型組與拆方Ⅲ組比較

5、，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；灌藥6周末血壓:在灌藥2周末血壓基礎(chǔ)上，卡托普利組、拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組、全方組血壓持續(xù)下降;與模型組比較，除拆方Ⅲ組外，其余各藥物干預(yù)組血壓明顯下降（P＜0.05）;與卡托普利組比較，拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組、拆方Ⅲ組血壓升高(P＜0.05)，與全方組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義;拆方組中，全方組血壓下降幅度最大，與其它拆方組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。⑶藥物對腎血管性高血壓大鼠血管活血物質(zhì)及炎性物質(zhì)的影響：血清NO、C

6、RP:假手術(shù)組與正常組較其余各組血清NO濃度明顯升高，而血清CRP濃度明顯降低（P＜0.05）;與模型組比較，除拆方Ⅲ組外，其余各藥物干預(yù)組血清NO濃度升高、血清CRP濃度明顯下降(P＜0.05);與卡托普利組比較，除全方組外，拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組、拆方Ⅲ組血清NO濃度降低明顯(P＜0.05)，拆方Ⅰ組較拆方Ⅱ組及拆方Ⅲ組血清NO濃度升高(P＜0.05)。與卡托普利組比較，拆方Ⅰ組、全方組血清CRP濃度降低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義;就拆方組而言

7、，其中拆方Ⅰ組及全方組較其余各拆方組血清CRP濃度降低明顯(P＜0.05)，相比拆方Ⅱ組，拆方Ⅲ組血清CRP濃度明顯升高(P＜0.05)；血清ET-1、AngⅡ:正常組、假手術(shù)組血清ET-1、AngⅡ濃度明顯低于其他六組(P＜0.05);與模型組比較，除拆方Ⅲ組外，其余各藥物干預(yù)組血清ET-1、AngⅡ濃度明顯降低(P＜0.05);拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組相比卡托普利組血清ET-1、AngⅡ濃度升高(P＜0.05)，而卡托普利組與全方組則無統(tǒng)

8、計學(xué)差異。拆方組中，全方組明顯低于其拆方各組(P＜0.05);拆方Ⅰ組血清ET-1、AngⅡ濃度較拆方Ⅱ組、拆方Ⅲ組明顯降低(P＜0.05)。⑷藥物對腎血管性高血壓大鼠胸主動脈中AT1R表達(dá)的影響:光鏡下，AT1R在正常組和假手術(shù)組中少量表達(dá)，而在模型組、拆方Ⅲ組中大量表達(dá);卡托普利組、拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組、全方組陽性表達(dá)略有增加。假手術(shù)組與正常組AT1R陽性表達(dá)明顯低于其余6組(P＜0.05);與模型組比較，除與拆方Ⅲ組比較無統(tǒng)計學(xué)意義

9、外，其余各藥物干預(yù)組AT1R陽性表達(dá)均減少(P＜0.05);卡托普利組對比拆方Ⅰ組與拆方Ⅱ組AT1R陽性表達(dá)明顯減少（P＜0.05）;就拆方組而言，全方組的AT1R陽性表達(dá)明顯低于其余各組(P＜0.05);拆方Ⅱ組、拆方Ⅲ組較拆方Ⅰ組AT1R陽性表達(dá)明顯升高(P＜0.05)。⑸藥物對腎血管性高血壓大鼠胸主動脈中膜的影響:光鏡下:正常組和假手術(shù)組中膜血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)細(xì)長呈梭行，排列整齊，胞核藍(lán)染;模型組和拆方Ⅲ組胸主動脈中膜增厚

10、，VSMC排列不規(guī)則且細(xì)胞核數(shù)量增加;卡托普利組、拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組、全方組可見中膜略有增厚，VSMC排列欠規(guī)則，細(xì)胞核數(shù)量略增多。與正常組、假手術(shù)組比較，其余各組中膜均明顯增厚(P＜0.05);與模型組比較，除拆方Ⅲ組外，其余各藥物干預(yù)組胸主動脈中膜厚度均顯著降低(P＜0.05);全方組較其余拆方組相比中膜厚度降低(P＜0.05)，而與卡托普利組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。拆方組中，全方組中膜厚度低于其拆方(P＜0.05);與拆方Ⅰ組比較，拆

11、方Ⅱ組和拆方Ⅲ組均升高(P＜0.05);拆方Ⅱ組中膜厚度較拆方Ⅲ組降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論：①蛭龍活血通瘀膠囊全方及拆方Ⅰ組（補(bǔ)氣組）、拆方Ⅱ組（活血化瘀組）能明顯降低腎血管性高血壓大鼠血壓，對腎血管性高血壓有良好的治療作用，降壓效果為全方組＞拆方Ⅰ組＞拆方Ⅱ組，拆方Ⅲ組無降壓功效。②蛭龍活血通瘀膠囊全方及拆方Ⅰ組、拆方Ⅱ組對腎血管性高血壓大鼠的降壓作用機(jī)制可能通過以下途徑：對血管活血物質(zhì)進(jìn)行調(diào)控，增加NO的釋放以增強(qiáng)舒血