蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)局灶性腦缺血大鼠微血管保護(hù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過觀察蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)局灶性腦缺血大鼠微血管新生及相關(guān)因子的影響，探討蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)局灶性腦缺血大鼠微血管保護(hù)的機(jī)制，以期從促進(jìn)腦微血管新生角度探討蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)缺血性腦卒中神經(jīng)功能恢復(fù)的治療作用，為蛭龍活血通瘀膠囊治療腦梗死提供新依據(jù)。
　　 方法:將120只健康雄性成年SD大鼠，體重(250-300)g，隨機(jī)分為6個(gè)組（另30只備用）:假手術(shù)組、模型組、蛭龍活血通瘀膠囊高劑量組（簡稱“高劑量組”）、蛭龍活血

2、通瘀膠囊中劑量組（簡稱“中劑量組”）、蛭龍活血通瘀膠囊低劑量組（簡稱“低劑量組”）、步長腦心通對(duì)照組（簡稱“腦心通組”），每組20只。以Zea longa法為標(biāo)準(zhǔn)制作大鼠大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型，假手術(shù)組只行正中切口，但不插入線栓。各用藥組均在動(dòng)物蘇醒后灌胃，假手術(shù)組和模型組給予等體積生理鹽水灌胃，采用Zealonga評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行5分制神經(jīng)功能缺損評(píng)分，術(shù)后7天，測定血清VEGF含量;心臟灌注固定，斷頭取腦，HE染色觀察組織形態(tài)學(xué)

3、改變;采用免疫組化方法檢測大腦皮層缺血區(qū)微血管密度(CD31)、TGF-β1、Ang-1、Tie-2的蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果:(1)大鼠一般情況及神經(jīng)功能缺損評(píng)分。假手術(shù)組大鼠毛色光澤，行動(dòng)敏捷，攝食正常，對(duì)周圍變化反應(yīng)靈敏，未出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損癥狀。模型組大鼠毛色失去光澤，狀態(tài)萎靡，攝食及自主活動(dòng)減少，出現(xiàn)明顯神經(jīng)功能缺損癥狀，神經(jīng)功能缺損評(píng)分在2.00-3.96之間。高劑量組大鼠毛色光澤，精神狀態(tài)良好，攝食正常，自主活動(dòng)恢復(fù)較

4、快，神經(jīng)功能缺損評(píng)分在1.41-2.47之間。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分明顯升高，差異有顯著性(P＜0.01)，給藥各組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與模型組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分均明顯降低，差異有顯著性(P＜0.01)，低劑量組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分也有一定程度的降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與低劑量組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組神經(jīng)功能缺損

5、評(píng)分均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);高劑量組、中劑量組、腦心通組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分組間兩兩比較，均無顯著性差異(P＞0.05)。(2)蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)腦缺血大鼠血清VEGF含量的影響:與假手術(shù)組比較，模型組及給藥各組大鼠VEGF含量明顯升高，差異有顯著性（P＜0.01）。與模型組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組VEGF含量明顯升高，差異有顯著性(P＜0.01);低劑量組大鼠VEGF含量升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05

6、）。與低劑量組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠，VEGF含量均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(3)腦組織形態(tài)學(xué)改變:假手術(shù)組:大鼠腦組織形態(tài)正常，各腦區(qū)染色均勻，組織結(jié)構(gòu)清晰致密，神經(jīng)細(xì)胞呈顆粒狀、錐體狀以及不規(guī)則形，細(xì)胞質(zhì)淡紅色，胞核藍(lán)染，輪廓清楚。模型組:大鼠缺血側(cè)腦組織結(jié)構(gòu)紊亂、細(xì)胞溶解、模糊，神經(jīng)纖維松散、嚴(yán)重水腫，可見嗜神經(jīng)細(xì)胞現(xiàn)象及泡沫細(xì)胞;白質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞。低劑量組:缺血側(cè)腦組織結(jié)構(gòu)紊亂、間質(zhì)水腫、染色淡，可見

7、神經(jīng)元數(shù)量減少，呈變性、壞死改變，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞相對(duì)增多，可見嗜神經(jīng)細(xì)胞現(xiàn)象及泡沫細(xì)胞;部分血管擴(kuò)張，出現(xiàn)血管周圍水腫;可見炎細(xì)胞浸潤。中劑量組、高劑量組及腦心通組缺血側(cè)腦組織各區(qū)也可以見到低劑量組改變，但組織結(jié)構(gòu)紊亂及間質(zhì)水腫減輕，壞死細(xì)胞明顯減少，細(xì)胞變性程度減輕。(4)各組腦缺血大鼠微血管密度(CD31)結(jié)果:與假手術(shù)組比較，模型組大鼠腦組織CD31表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，各組給藥大鼠腦組織CD31表達(dá)明顯升高，

8、差異有顯著性(P＜0.01)。與模型組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠腦組織CD31表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，低劑量組大鼠腦組織CD31表達(dá)有所升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與低劑量組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠腦組織CD31表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。高劑量組、中劑量組與腦心通組組間兩兩比較，大鼠腦組織CD31表達(dá)均無顯著性差異(P＞0.05)。(5)蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)腦缺血大

9、鼠腦組織TGF-β1蛋白表達(dá)的影響:與假手術(shù)組比較，模型組大鼠腦組織TGF-β1表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，給藥各組大鼠腦組織TGF-β1表達(dá)明顯升高，差異有顯著性(P＜0.01)。與模型組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠腦組織TGF-β1表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，低劑量組大鼠腦組織TGF-β1表達(dá)有所升高，但無顯著性差異(P＞0.05)。與低劑量組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠腦組織TG

10、F-β1表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);高劑量組、中劑量組及腦心通組組間兩兩比較，腦組織TGF-β1表達(dá)均無顯著性差異(P＞0.05)。(6)蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)腦缺血大鼠腦組織Ang-1、Tie-2蛋白表達(dá)的影響:與假手術(shù)組比較，模型組大鼠Ang-1、Tie-2表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，給藥各組大鼠Ang-1、Tie-2表達(dá)明顯升高，差異有顯著性(P＜0.01)。與模型組比較，低劑量組大鼠Ang-1、Tie

11、-2表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠Ang-1、Tie-2表達(dá)明顯升高，差異有顯著性(P＜0.01)。與低劑量組比較，高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠Ang-1、Tie-2表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。高劑量組、中劑量組及腦心通組大鼠Ang-1、Tie-2表達(dá)組間兩兩比較，均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:(1)蛭龍活血通瘀膠囊能明顯改善腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺損