蛭龍活血通瘀膠囊拆方組分對高血壓血管重構的影響.pdf

1、目的：觀察蛭龍活血通瘀膠囊拆方組分對大鼠血清丙二醇(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)含量和血管NF-κB、ICAM-1表達的影響，探討它們對高血壓血管重構的影響及作用機制。
　　方法：雄性Wistar大鼠110只，采用單純隨機抽樣法抽取正常組12只、假手術組12只。其余大鼠予以腎性高血壓大鼠模型建立，其手術方式為縮窄左腎動脈;于2周后篩選模型成功大鼠77只。第7周，從77只大鼠中采用單純隨機抽樣法抽取模型組10只、卡托普利組10

2、只、全方組10只、補氣組10只、溫通經絡組10只、活血化瘀組10只。分別以相應藥物1次/日給予灌胃，正常組、假手術組以及模型組予以同體積生理鹽水。經4周灌胃后，大鼠腹主動脈進行取血，以制備血清。運用化學比色法測量血清MDA、SOD含量。取大鼠胸主動脈，經HE染色后，電鏡下觀察血管中膜變化，并測量血管中膜厚度(MT)、管腔內徑(LD)、血管中膜厚度/管腔內徑比(MT/LD)。運用免疫組化染色方法檢測血管NF-κB、ICAM-1表達，并用w

3、estern blot的方法進一步檢測血管ICAM-1表達。
　　結果：⑴藥物對血壓的影響：大鼠基礎血壓值:各組間差異無統(tǒng)計學意義；手術后2周及6周大鼠血壓值:正常組和假手術組比較，血壓值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);模型組較正常組和假手術組顯著升高(P＜0.05);模型組血壓值均超過150mmHg，且較基礎血壓升高20mmHg。模型組與各治療組比較及各治療組間比較血壓值差異均無統(tǒng)計學意義；用藥4周后大鼠血壓:正常組和假手術組

4、比較，血壓值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較正常組、假手術組及各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較全方組降低不顯著(P＞0.05)，較余治療組顯著降低(P＜0.05);且補氣組較活血化瘀組降低不顯著(P＞0.05)，較溫通經絡組顯著降低(P＜0.05)。⑵藥物對腎性高血壓大鼠氧化應激的影響：藥物對腎性高血壓大鼠血清MDA的影響:正常組和假手術組比較，血清MDA值差異無統(tǒng)計學意義

5、(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較補氣組、活血化瘀組升高不顯著(P＞0.05)，較假手術組、正常組及余治療組顯著升高(P＜0.05)，且補氣組較活血化瘀組升高不顯著(P＞0.05);全方組較卡托普利組升高不顯著(P＞0.05)，較溫通經絡組及活血化瘀組顯著降低(P＜0.05)，且活血化瘀組較溫通經絡組升高不顯著(P＞0.05)；藥物對腎性高血壓大鼠血清SOD的影響:正常組和假手術組比較，血清SOD值差異無

6、統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著升高(P＜0.05);模型組較補氣組、溫通經絡組、活血化瘀組降低不顯著(P＞0.05)，較其余各治療組顯著降低(P＜0.05);且溫通經絡組較活血化瘀組降低不顯著(P＞0.05)，較補氣組升高不顯著(P＞0.05);卡托普利組較全方組及活血化瘀組升高不顯著(P＞0.05)，且全方組較活血化瘀組升高不顯著(P＞0.05)。⑶藥物對腎性高血壓大鼠胸主動脈中膜的影響:正常組及假手術組血管中膜可見平

7、滑肌細胞排列大致整齊，未見肥大、增生。模型組血管中膜可見中膜明顯增厚，平滑肌細胞數(shù)增加，排列紊亂;彈力纖維增生，以及斷裂;偶可見泡沫細胞。經治療后，卡托普利組、全方組、補氣組平滑肌細胞和彈力纖維增生程度較模型組明顯降低，溫通經絡組、活血化瘀組較模型組增生程度輕度降低。⑷藥物對腎性高血壓大鼠胸主動脈MT、LD、MT/LD的影響：藥物對腎性高血壓大鼠胸主動脈MT的影響:正常組和假手術組比較，MT值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，且均較其余

8、各組顯著降低(P＜0.05);模型組較各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較全方組降低不顯著(P＞0.05)，較余各藥物組顯著降低(P＜0.05);補氣組較全方組升高不顯著(P＞0.05)，較溫通經絡組及活血化瘀組降低不顯著(P＞0.05)，且溫通經絡組較活血化瘀組減低不顯著(P＞0.05)；藥物對腎性高血壓大鼠胸主動脈LD的影響:正常組和假手術組比較，LD值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著升高(P＜0.05

9、);模型組較活血化瘀組及溫通經絡組降低不顯著(P＞0.05)，且活血化瘀組較溫通經絡組升高不顯著(P＞0.05);各治療組顯著降低(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著升高(P＜0.05);補氣組較全方組顯著降低(P＜0.05)，較活血化瘀組及溫通經絡組升高不顯著(P＞0.05)；藥物對腎性高血壓大鼠胸主動脈MT/LD的影響:正常組和假手術組比較，MT/LD值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著升高(P＜0.05);

10、模型組較各治療組顯著降低(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著升高(P＜0.05);補氣組較全方組顯著降低(P＜0.05)，較活血化瘀組及溫通經絡組顯著升高(P＜0.05)，且活血化瘀組較溫通經絡組升高不顯著(P＞0.05)。⑸藥物對高血壓大鼠胸主動脈NF-κB蛋白表達的影響（免疫組化法）:電鏡下，棕黃色顆粒為NF-κB蛋白陽性表達，主要分布于血管中膜平滑肌。正常組及假手術組可見少量的棕黃色顆粒;模型組可見散在分布的大量表達棕黃色顆

11、粒;經治療后，卡托普利組、全方組表達較模型組明顯減少，補氣組、溫通經絡組、活血化瘀組表達較模型組有所減少。其中卡托普利組較全方組有所減少;補氣組較活血化瘀組表達明顯減少，與溫通經絡組表達相當。⑹各組大鼠胸主動脈平滑肌中NF-κB陽性表達的平均光密度值(IOD)比較:正常組和假手術組比較，IOD值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著降低

12、(P＜0.05);溫通經絡組較全方組顯著升高(P＜0.05)，較活血化瘀組顯著降低(P＞0.05)，且較補氣組降低不顯著(P＞0.05)。⑺藥物對高血壓大鼠胸主動脈ICAM-1表達的影響（免疫組化法）:電鏡下，棕黃色顆粒為NF-κB蛋白陽性表達，主要分布于血管中膜平滑肌。正常組及假手術組可見少量的棕黃色顆粒;模型組可見散在分布的大量棕黃色顆粒;經治療后，卡托普利組、全方組表達較模型組明顯減少，補氣組、溫通經絡組、活血化瘀組表達較模型組有

13、所減少。⑻各組大鼠胸主動脈平滑肌中ICAM-1陽性表達的平均光密度值(IOD)比較:正常組和假手術組比較，IOD值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著降低(P＜0.05);溫通經絡組較全方組顯著升高(P＜0.05)，較活血化瘀組顯著降低(P＞0.05)，且較補氣組降低不顯著(P＞0.05)。⑼藥物對高血壓大鼠胸主動脈ICAM-1表達的

14、影響（western blot法）:正常組和假手術組比較，IOD值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著降低(P＜0.05);溫通經絡組較全方組顯著升高(P＜0.05)，較活血化瘀組顯著降低(P＞0.05)，且較補氣組降低不顯著(P＞0.05)。
　　結論：①不完全結扎左腎動脈的手術方式，成功制備了腎性高血壓大鼠模型。②蛭龍活血通

15、瘀膠囊及其拆方組分對腎性高血壓大鼠血管重構有明顯治療作用，其作用機制包括氧化應激、炎癥反應、血管剪切力。③蛭龍活血通瘀膠囊不同拆方組分從不同的方面對高血壓大鼠血管重構發(fā)揮治療作用：補氣組在降低血壓方面作用突出；溫通經絡組:在降低MDA、NF-κB蛋白表達、ICAM-1蛋白表達方面作用顯著；活血化瘀組能降低血壓、NF-κB蛋白表達、ICAM-1蛋白表達。這說明，蛭龍活血通瘀膠囊其對腎性高血壓大鼠血管重構機制，可能與其降低血壓、抗氧化應激、