自體CIK細胞過繼性免疫治療肺癌的實驗研究.pdf

1、目的:探討細胞因子誘導的殺傷細胞（CIK細胞）過繼免疫療法對治療肺癌臨床療效的評估。
　　方法:選取2013年11月～2015年2月河北省滄州中西醫(yī)結合醫(yī)院腫瘤內科、腫瘤外科住院患者27例，其中男性18例，女性9例。所有患者均經病理確診為肺癌，最近未進行放、化療，小細胞肺癌15例，非小細胞肺癌12例，按WHO分類標準分型。并根據(jù)患者性別、年齡、病理類型，選擇同期進行最佳支持治療的11例肺癌患者作為對照組，治療組與對照組基線水平具有

2、可比性。采集肺癌患者外周血單個核細胞，體外用多種細胞因子刺激獲得CIK細胞，動態(tài)監(jiān)測培養(yǎng)過程中CIK細胞的增殖活性和細胞表型變化;用流式細胞儀動態(tài)監(jiān)測CIK細胞回輸治療前后患者外周血T淋巴細胞亞群的比例、Th1/Th2型細胞因子、Treg細胞和NK細胞數(shù)量的變化;采用羅氏全自動化學發(fā)光分析儀監(jiān)測治療前后患者外周血腫瘤標志物胃泌素釋放肽前體（PRO-GRP）、非小細胞肺癌相關抗原(CYFRA21-1)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)水平的

3、變化;觀察CIK細胞治療后，患者的臨床癥狀、毒副反應及患者自身免疫功能的改變。
　　結果:
　　1治療組肺癌患者自體CIK細胞比培養(yǎng)前有明顯增高，在培養(yǎng)的第4d開始快速增殖，13～19 d可達到高峰，培養(yǎng)后的CIK細胞總數(shù)可達(5.10～8.98)×107/ml(平均值為6.61×107/ml)。CD3+CD56+T細胞等在2周后獲得大量增殖，增值比例由1.15±0.55％上升為32.25±5.01％。
　　2治療組患

4、者在CIK細胞治療后2周，外周血中CD3+、CD4+T細胞、CD4+/CD8+比值相對于治療前有所增高，于治療后4周左右達高峰(P＜0.01)，此后逐漸減低，但指標仍然高于對照組(P＜0.05），與對照組相比具有統(tǒng)計學差異。治療前CD3+T細胞為44.11±5.12％，于第4周達到72.31±7.11％，在8周降低至55.12±5.12％。治療前CD4+T細胞為24.13±5.13％，治療后有所上升，于第4周達到41.23±6.55％，

5、在8周降低至27.71±6.95％。CD4+CD8+T細胞在治療前為1.03±0.25％，治療后第4周達到1.99±0.29％，之后逐漸降低，于第8周達到1.35±0.33％。
　　3治療組肺癌患者外周血Treg細胞比值在治療后逐漸下調，Treg細胞比值由8.98±3.12％降為5.92±1.99％，與對照組相比具有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。但NK細胞與治療前水平相比有所增高，比例由10.12±3.12％升高為13.34±3.1

6、0％(P＜0.05)。
　　4治療組肺癌患者外周血Th2（IL-4、IL-10）水平下降，至4周左右最低，與對照組相比具有統(tǒng)計學差異（P＜0.01）;治療后患者外周血Th1(IL-2、INF-γ）水平顯著增加，在4周達到高峰(P＜0.01)，8周后下降(P＜0.05)，與對照組相比具有統(tǒng)計學差異。治療后IL-4由23.41±5.19 pg/ml持續(xù)下降，于4周達到9.11±6.52 pg/ml，在8周有所回升，達到17.11±6.

7、31 pg/ml。治療后IL-10由16.31±5.17 pg/ml連續(xù)下降，在4周達到5.13±1.91 pg/ml，在8周有所升高，達到10.22±4.98 pg/ml。治療后IL-2由21.21±5.98 pg/ml連續(xù)增高，在4周達到72.31±6.11 pg/ml，在8周下降，達到55.31±5.12 pg/ml。治療后INF-γ由29.13±9.88 pg/ml持續(xù)增高，在4周達到61.71±10.03 pg/ml，在8周下

8、降，達到35.28±9.18 pg/ml。
　　5肺癌患者外周血CYFRA21-1、PRO-GRP、NSE等腫瘤標志物在CIK細胞治療前后相比均有統(tǒng)計學差異。CYFRA21-1由6.12±0.21 ng/ml下降為3.02±0.13 ng/ml(P＜0.01)。PRO-GRP由92.11±5.10 pg/ml下降為48.27±4.92 pg/ml(P＜0.01)。NSE由29.44±2.95 ng/ml下降至14.93±2.98n

9、g/ml(P＜0.01)。
　　627例肺癌患者經CIK細胞治療后，治療組肺癌患者治療后生命質量有明顯提高，治療過程中無其它明顯不良反應。
　　結論:
　　1肺癌患者在CIK細胞治療后，大多數(shù)患者外周血NSE、CYFRA21-1、PRO-GRP等腫瘤標志物明顯降低。血液腫瘤標志物的出現(xiàn)，可以在癥狀出現(xiàn)前1～6個月檢測到，尤其是腫瘤發(fā)生復發(fā)及轉移時，血液腫瘤標志物可比體征及影像診斷提前3～6個月。所以，腫瘤標志物的檢測可

10、作為規(guī)范化CIK細胞治療的一個監(jiān)測手段，用于動態(tài)觀察不同類型肺癌患者的治療效果。
　　2 CIK細胞治療在抑制機體免疫Th1/Th2的漂移以及恢復Th1/Th2的平衡中具有重要作用，從而使肺癌患者保持良好的抗腫瘤免疫狀態(tài)。
　　3 Treg細胞比例的升高與肺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關，對機體的抗腫瘤免疫反應起負向調節(jié)作用。在自體CIK治療后，Treg細胞比例及其活性明顯降低。
　　4 CIK細胞過繼免疫治療肺癌不但療效顯著