自體CIK細(xì)胞過繼性免疫治療肺癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK細(xì)胞）過繼免疫療法對(duì)治療肺癌臨床療效的評(píng)估。
　　方法:選取2013年11月～2015年2月河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院腫瘤內(nèi)科、腫瘤外科住院患者27例，其中男性18例，女性9例。所有患者均經(jīng)病理確診為肺癌，最近未進(jìn)行放、化療，小細(xì)胞肺癌15例，非小細(xì)胞肺癌12例，按WHO分類標(biāo)準(zhǔn)分型。并根據(jù)患者性別、年齡、病理類型，選擇同期進(jìn)行最佳支持治療的11例肺癌患者作為對(duì)照組，治療組與對(duì)照組基線水平具有

2、可比性。采集肺癌患者外周血單個(gè)核細(xì)胞，體外用多種細(xì)胞因子刺激獲得CIK細(xì)胞，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)過程中CIK細(xì)胞的增殖活性和細(xì)胞表型變化;用流式細(xì)胞儀動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CIK細(xì)胞回輸治療前后患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的比例、Th1/Th2型細(xì)胞因子、Treg細(xì)胞和NK細(xì)胞數(shù)量的變化;采用羅氏全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀監(jiān)測(cè)治療前后患者外周血腫瘤標(biāo)志物胃泌素釋放肽前體（PRO-GRP）、非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原(CYFRA21-1)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)水平的

3、變化;觀察CIK細(xì)胞治療后，患者的臨床癥狀、毒副反應(yīng)及患者自身免疫功能的改變。
　　結(jié)果:
　　1治療組肺癌患者自體CIK細(xì)胞比培養(yǎng)前有明顯增高，在培養(yǎng)的第4d開始快速增殖，13～19 d可達(dá)到高峰，培養(yǎng)后的CIK細(xì)胞總數(shù)可達(dá)(5.10～8.98)×107/ml(平均值為6.61×107/ml)。CD3+CD56+T細(xì)胞等在2周后獲得大量增殖，增值比例由1.15±0.55％上升為32.25±5.01％。
　　2治療組患

4、者在CIK細(xì)胞治療后2周，外周血中CD3+、CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+比值相對(duì)于治療前有所增高，于治療后4周左右達(dá)高峰(P＜0.01)，此后逐漸減低，但指標(biāo)仍然高于對(duì)照組(P＜0.05），與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。治療前CD3+T細(xì)胞為44.11±5.12％，于第4周達(dá)到72.31±7.11％，在8周降低至55.12±5.12％。治療前CD4+T細(xì)胞為24.13±5.13％，治療后有所上升，于第4周達(dá)到41.23±6.55％，

5、在8周降低至27.71±6.95％。CD4+CD8+T細(xì)胞在治療前為1.03±0.25％，治療后第4周達(dá)到1.99±0.29％，之后逐漸降低，于第8周達(dá)到1.35±0.33％。
　　3治療組肺癌患者外周血Treg細(xì)胞比值在治療后逐漸下調(diào)，Treg細(xì)胞比值由8.98±3.12％降為5.92±1.99％，與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。但NK細(xì)胞與治療前水平相比有所增高，比例由10.12±3.12％升高為13.34±3.1

6、0％(P＜0.05)。
　　4治療組肺癌患者外周血Th2（IL-4、IL-10）水平下降，至4周左右最低，與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）;治療后患者外周血Th1(IL-2、INF-γ）水平顯著增加，在4周達(dá)到高峰(P＜0.01)，8周后下降(P＜0.05)，與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。治療后IL-4由23.41±5.19 pg/ml持續(xù)下降，于4周達(dá)到9.11±6.52 pg/ml，在8周有所回升，達(dá)到17.11±6.

7、31 pg/ml。治療后IL-10由16.31±5.17 pg/ml連續(xù)下降，在4周達(dá)到5.13±1.91 pg/ml，在8周有所升高，達(dá)到10.22±4.98 pg/ml。治療后IL-2由21.21±5.98 pg/ml連續(xù)增高，在4周達(dá)到72.31±6.11 pg/ml，在8周下降，達(dá)到55.31±5.12 pg/ml。治療后INF-γ由29.13±9.88 pg/ml持續(xù)增高，在4周達(dá)到61.71±10.03 pg/ml，在8周下

8、降，達(dá)到35.28±9.18 pg/ml。
　　5肺癌患者外周血CYFRA21-1、PRO-GRP、NSE等腫瘤標(biāo)志物在CIK細(xì)胞治療前后相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。CYFRA21-1由6.12±0.21 ng/ml下降為3.02±0.13 ng/ml(P＜0.01)。PRO-GRP由92.11±5.10 pg/ml下降為48.27±4.92 pg/ml(P＜0.01)。NSE由29.44±2.95 ng/ml下降至14.93±2.98n

9、g/ml(P＜0.01)。
　　627例肺癌患者經(jīng)CIK細(xì)胞治療后，治療組肺癌患者治療后生命質(zhì)量有明顯提高，治療過程中無(wú)其它明顯不良反應(yīng)。
　　結(jié)論:
　　1肺癌患者在CIK細(xì)胞治療后，大多數(shù)患者外周血NSE、CYFRA21-1、PRO-GRP等腫瘤標(biāo)志物明顯降低。血液腫瘤標(biāo)志物的出現(xiàn)，可以在癥狀出現(xiàn)前1～6個(gè)月檢測(cè)到，尤其是腫瘤發(fā)生復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移時(shí)，血液腫瘤標(biāo)志物可比體征及影像診斷提前3～6個(gè)月。所以，腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)可

10、作為規(guī)范化CIK細(xì)胞治療的一個(gè)監(jiān)測(cè)手段，用于動(dòng)態(tài)觀察不同類型肺癌患者的治療效果。
　　2 CIK細(xì)胞治療在抑制機(jī)體免疫Th1/Th2的漂移以及恢復(fù)Th1/Th2的平衡中具有重要作用，從而使肺癌患者保持良好的抗腫瘤免疫狀態(tài)。
　　3 Treg細(xì)胞比例的升高與肺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，對(duì)機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)起負(fù)向調(diào)節(jié)作用。在自體CIK治療后，Treg細(xì)胞比例及其活性明顯降低。
　　4 CIK細(xì)胞過繼免疫治療肺癌不但療效顯著