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1、目的:探討調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在RAK過(guò)繼免疫細(xì)胞治療中發(fā)揮的免疫負(fù)性調(diào)節(jié)作用,評(píng)價(jià)在RAK細(xì)胞培養(yǎng)前剔除調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的應(yīng)用價(jià)值。
方法:外周血分離獲得的PBMC通過(guò)免疫磁珠分選法和流式細(xì)胞分選法分離剔除調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,比較兩種方法的優(yōu)劣。剔除后細(xì)胞經(jīng)CD3mAb和Retronectin兩種蛋白刺激后進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中監(jiān)測(cè)細(xì)胞的表型變化和增殖倍數(shù),MTS法檢測(cè)體外殺傷效果。
結(jié)果:
1)免疫磁珠分選法能
2、夠有效的剔除調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,且不會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài);
2)剔除后細(xì)胞經(jīng)CD3mAb和Retronectin聯(lián)合刺激可使細(xì)胞的增殖倍數(shù)明顯提高,體外持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng);
3)剔除組細(xì)胞表現(xiàn)以CD8+T細(xì)胞為主,表現(xiàn)出較強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞殺傷活性;
4)剔除調(diào)節(jié)性T細(xì)胞后,淋巴細(xì)胞自分泌的抑制性細(xì)胞因子IL-10得到了降低。
結(jié)論:Retronectin和CD3mAb聯(lián)用所培養(yǎng)獲得RAK細(xì)胞具有較強(qiáng)的增
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