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文檔簡介
1、近數(shù)十年來,不孕癥發(fā)病率呈上升趨勢,目前我國育齡期夫婦中不孕癥約有10%-15%,IVF技術(shù)已成為不孕夫婦獲得生育機(jī)會(huì)的主要途徑。盡管隨著社會(huì)發(fā)展和科技進(jìn)步,輔助生殖藥物日漸優(yōu)化,促排卵方案和技術(shù)更加個(gè)體化,但近年來IVF成功率卻陷入瓶頸狀態(tài)。大多數(shù)情況下,超促排卵前,臨床醫(yī)師會(huì)根據(jù)患者年齡、AFC、d3基礎(chǔ)內(nèi)分泌及AMH值等對卵巢儲(chǔ)備功能進(jìn)行評估并選擇相應(yīng)的促排卵方案及Gn劑量,但并非所有不孕癥患者對超促排卵都有預(yù)期理想的反應(yīng)。與自然
2、妊娠相比,促排卵藥物的應(yīng)用使得獲卵數(shù)增加及優(yōu)胚數(shù)增加,但是也不可避免地影響了激素的平衡,卵巢高反應(yīng)狀態(tài)下子宮內(nèi)膜與胚胎的相容性成了不可忽視的問題。超促排卵過程中,血清雌激素水平高于自然周期的數(shù)倍甚至數(shù)十倍。如此之高雌激素除了增加誘發(fā)OHSS的風(fēng)險(xiǎn)之外,對臨床結(jié)局還有可能產(chǎn)生會(huì)產(chǎn)生影響。
本課題旨在闡明高雌激素狀態(tài)下,與著床密切相關(guān)的內(nèi)膜形態(tài)學(xué)改變、超微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞因子和相關(guān)基因HOXA10對子宮內(nèi)膜容受性的影響及其可能的作用機(jī)制
3、。
第一部分:卵巢高反應(yīng)對IVF妊娠結(jié)局的影響
目的:觀察超促排卵治療后不同卵巢反應(yīng)水平婦女的IVF-ET妊娠結(jié)局,評估HCG日E2水平對卵子、胚胎發(fā)育的影響,探尋不損害子宮內(nèi)膜容受性的的血清E2峰值水平的適度范圍。
材料與方法:回顧分析2013.1-2013.12我院生殖中心因輸卵管因素和(或)男性因素接受IVF/ICSI治療的680個(gè)治療周期,根據(jù)HCG注射日血E2水平分為卵巢高反應(yīng)組、正常反應(yīng)組及低反
4、應(yīng)組。比較各組IVF-ET中的卵子、胚胎發(fā)育情況以及妊娠結(jié)局。
結(jié)果:從低反應(yīng)到正常反應(yīng)再到高反應(yīng)組,三組獲得的卵子數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)呈遞增趨勢,卵巢高反應(yīng)組顯著高于低反應(yīng)組及正常反應(yīng)組(P<0.01),但三組間的受精率、正常受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率差異無顯著性(P>0.05)。高反應(yīng)組胚胎移植取消率為12.62%,顯著高于正常反應(yīng)組,而胚胎種植率、臨床妊娠率較正常反應(yīng)組顯著性減低(P<0.01)。流產(chǎn)率各組間無顯著差異(P>0
5、.05)。正常反應(yīng)組中,重度卵巢過度刺激綜合征(OHSS)發(fā)生率低于高反應(yīng)組,但兩組比較,差異無顯著性(P>0.05),而低反應(yīng)組與高反應(yīng)組OHSS發(fā)生率有顯著性差異(P<0.01)。
結(jié)論:理想的IVF妊娠結(jié)局需要合適的E2水平.卵巢低反應(yīng)和高反應(yīng)均不利于IVF妊娠結(jié)局,低反應(yīng)可能因獲卵數(shù)少致可移植胚胎數(shù)下降所致,而高反應(yīng)則可能通過影響ER而降低IVF妊娠率。
第二部分:卵巢高反應(yīng)對圍著床期子宮內(nèi)膜形態(tài)及相關(guān)分子表
6、達(dá)的影響
目的:通過比較COH周期不同卵巢反應(yīng)與自然周期的患者子宮內(nèi)膜分泌期改變、胞飲突(pinopode)發(fā)育和整合素β3、LIF的表達(dá),分析其對子宮內(nèi)膜容受性(ER)的影響。
材料與方法:共對18個(gè)刺激周期(SC,根據(jù)HCG日血清E2值分為SC1組(高反應(yīng)組)和SC2組(正常反應(yīng)組)和18個(gè)NC組(自然周期組)婦女分別在取卵后或排卵后的第6+1天行外周血雌二醇(E2)、孕酮(P4)水平檢測和子宮內(nèi)膜活檢術(shù),常規(guī)H
7、E染色確定病理分期,采用掃描電鏡觀察胞飲突發(fā)育情況,免疫組化觀察整合素β3、LIF表達(dá)情況。
結(jié)果:三組的峰值血清E2、分泌中期P4水平依次遞減,各組間存在顯著差異(P<0.01)。SC1組內(nèi)膜發(fā)育較SC2和NC組稍提早1~2天。SC1組出現(xiàn)腺體-基質(zhì)不同步明顯,腺體可見較多核下空泡,發(fā)育明顯落后于基質(zhì)。與NC組相比,SC1組隨卵巢反應(yīng)程度越高,內(nèi)膜腺體擴(kuò)張扭曲和基質(zhì)水腫更顯著。SC1組胞飲突發(fā)育情況與SC2組及NC組相比較,
8、均有明顯差異(P<0.01).SC1組整合素β3在子宮內(nèi)膜的表達(dá)略低于SC2組,明顯低于NC對照組,有顯著性差異(P<0.01)。SC1組整合素LIF在子宮內(nèi)膜的表達(dá)略低于NC對照組,與SC2組差異不明顯。
結(jié)論:COH中過高的E2、P4水平可刺激子宮內(nèi)膜分泌期改變提前和胞飲突提早發(fā)育,可能對胚胎著床造成不利影響.高雌激素也可刺激著床期內(nèi)膜整合素β3和LIF的表達(dá)降低。著床窗口期細(xì)胞因子整合素β3和LIF的表達(dá)異常和胞飲突發(fā)育
9、的退化可能是導(dǎo)致COH周期ER下降的原因。
第三部分:卵巢高反應(yīng)對圍著床期子宮內(nèi)膜相關(guān)基因HOXA10表達(dá)的影響
目的:對比觀察接受體外受精/卵胞漿內(nèi)單精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)卵巢高反應(yīng)和和正常反應(yīng)婦女刺激周期子宮內(nèi)膜種植窗口期子宮內(nèi)膜上HOXA10基因表達(dá)的差異,以期發(fā)現(xiàn)其在不同卵巢反應(yīng)子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)基因HOXA10的變化,分析其與子宮內(nèi)膜容受性(ER)的關(guān)系。
材料與方法:因輸卵
10、管因素和(或)男性不育因素接受體外受精-胚胎移植治療于我院行IVF/ICSI治療的患者,高反應(yīng)組共8名,正常卵巢反應(yīng)組5名,在取卵后第6±1天行外周血雌二醇(E2)、孕酮(P4)水平檢測和子宮內(nèi)膜活檢術(shù),常規(guī)HE染色確定病理分期,采用免疫組化進(jìn)行HOXA10的蛋白定位,Westemblot檢測蛋白表達(dá)情況,RT-PCR觀察其mRNA轉(zhuǎn)錄水平。
結(jié)果:兩組患者子宮內(nèi)膜中均可檢測到HOXA10蛋白和基因的表達(dá).與正常反應(yīng)組比較,卵
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