卵巢高反應對子宮內膜接受性的影響.pdf

1、目的： 通過回顧性分析卵巢高反應對體外受精-胚胎移植/卵胞漿單精子注射(In vitro fertilization-embryo transfer/Intracytoplasmicsperm injection,IVF/ICSI)周期妊娠結局的影響,以及研究高反應狀態(tài)下子宮內膜接受性標記物的變化,并應用基因芯片技術比較卵巢高反應者與自然周期圍著床期子宮內膜基因表達譜的差異,分析相關基因的功能意義,探討高甾體激素影響子宮內膜接受

2、性的分子機制. 方法 1.回顧性分析本生殖中心近3年來IVF/ICSI周期資料,根據(jù)雌二醇(E2)峰值百分位數(shù)確定卵巢反應程度,將第25-75百分位數(shù)(P25-75)作為卵巢正常反應組(4,399-11,182 pmol/L,n=595),P75-90作為中等高反應組(11,183-15,145 pmol/L,n=180),P90以上作為卵巢高反應組(≥15,146 pmol/L,n=119),比較各組在新鮮周期和冷凍胚

3、胎移植周期的妊娠結局. 2.選擇因男性因素進入IVF/ICSI周期,由于受精失敗或避免重度卵巢刺激綜合征發(fā)生而取消胚胎移植的病例,并將這部分病人分為兩組:卵巢中等反應者為E2峰值在5,000-15,000 pmol/L(n=7).卵巢高反應者為E<,2>峰值>15,000 pmol/L(n=8).對照組為健康、已生育婦女(n=10).在圍著床期(hCG+7d/LH+7d)進行子宮內膜活檢.通過掃描電鏡觀察子宮內膜超微結構,免疫組

4、化檢測子宮內膜整合素β3和白血病抑制因子 (leukaemia inhibitory factor,LIF) 表達,應用圖像分析系統(tǒng)分析結果. 3.應用基因芯片檢測卵巢高反應者(n=4)和健康生育婦女(n=3)圍著床期子宮內膜的基因表達譜,篩選差異變化的基因,應用熒光定量PCR和免疫組化驗證部分變化基因.結合信息學工具和文獻檢索,分析相關基因功能意義. 結果 1.與正常反應組比較,卵巢高反應組獲卵數(shù)目增加,卵母細

5、胞和胚胎質量沒有差異,臨床妊娠率和著床率呈下降趨勢,尤其在E<,2>峰值≥15,146 pmol/L時,著床率明顯降低(P<0.05).在隨后的冷凍胚胎移植周期中,卵巢高反應組的妊娠率和著床率與正常反應組沒有差異(P>0.05). 2.在卵巢刺激周期中等反應和高反應組中,子宮內膜的胞飲突形態(tài)不典型或缺如,子宮內膜整合素β3和LIF表達均低于自然周期(P<0.05),卵巢高反應者的子宮內膜腺體LIF表達強度較中等反應者顯著降低 (

6、P<0.05). 3.經過基因芯片檢測,在卵巢高反應者圍著床期子宮內膜的基因表達譜中,有364個基因表達變化在2倍以上,其中233個基因上調,131個基因下調.通過PANTHER數(shù)據(jù)庫的生物學過程分析,說明可能通過增強信號傳導,調節(jié)免疫等生物學過程來適應超生理激素狀態(tài).同時熒光定量PCR驗證了部分與子宮內膜功能相關的基因 (Mucin-1,OPN,IGFBP5,DPPIV,PLA2G2,SAT和IL6ST等),它們的變化可能與高