卵巢高反應(yīng)對(duì)子宮內(nèi)膜接受性的影響.pdf

1、目的： 通過(guò)回顧性分析卵巢高反應(yīng)對(duì)體外受精-胚胎移植/卵胞漿單精子注射(In vitro fertilization-embryo transfer/Intracytoplasmicsperm injection,IVF/ICSI)周期妊娠結(jié)局的影響,以及研究高反應(yīng)狀態(tài)下子宮內(nèi)膜接受性標(biāo)記物的變化,并應(yīng)用基因芯片技術(shù)比較卵巢高反應(yīng)者與自然周期圍著床期子宮內(nèi)膜基因表達(dá)譜的差異,分析相關(guān)基因的功能意義,探討高甾體激素影響子宮內(nèi)膜接受

2、性的分子機(jī)制. 方法 1.回顧性分析本生殖中心近3年來(lái)IVF/ICSI周期資料,根據(jù)雌二醇(E2)峰值百分位數(shù)確定卵巢反應(yīng)程度,將第25-75百分位數(shù)(P25-75)作為卵巢正常反應(yīng)組(4,399-11,182 pmol/L,n=595),P75-90作為中等高反應(yīng)組(11,183-15,145 pmol/L,n=180),P90以上作為卵巢高反應(yīng)組(≥15,146 pmol/L,n=119),比較各組在新鮮周期和冷凍胚

3、胎移植周期的妊娠結(jié)局. 2.選擇因男性因素進(jìn)入IVF/ICSI周期,由于受精失敗或避免重度卵巢刺激綜合征發(fā)生而取消胚胎移植的病例,并將這部分病人分為兩組:卵巢中等反應(yīng)者為E2峰值在5,000-15,000 pmol/L(n=7).卵巢高反應(yīng)者為E<,2>峰值>15,000 pmol/L(n=8).對(duì)照組為健康、已生育婦女(n=10).在圍著床期(hCG+7d/LH+7d)進(jìn)行子宮內(nèi)膜活檢.通過(guò)掃描電鏡觀察子宮內(nèi)膜超微結(jié)構(gòu),免疫組

4、化檢測(cè)子宮內(nèi)膜整合素β3和白血病抑制因子 (leukaemia inhibitory factor,LIF) 表達(dá),應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)分析結(jié)果. 3.應(yīng)用基因芯片檢測(cè)卵巢高反應(yīng)者(n=4)和健康生育婦女(n=3)圍著床期子宮內(nèi)膜的基因表達(dá)譜,篩選差異變化的基因,應(yīng)用熒光定量PCR和免疫組化驗(yàn)證部分變化基因.結(jié)合信息學(xué)工具和文獻(xiàn)檢索,分析相關(guān)基因功能意義. 結(jié)果 1.與正常反應(yīng)組比較,卵巢高反應(yīng)組獲卵數(shù)目增加,卵母細(xì)

5、胞和胚胎質(zhì)量沒(méi)有差異,臨床妊娠率和著床率呈下降趨勢(shì),尤其在E<,2>峰值≥15,146 pmol/L時(shí),著床率明顯降低(P<0.05).在隨后的冷凍胚胎移植周期中,卵巢高反應(yīng)組的妊娠率和著床率與正常反應(yīng)組沒(méi)有差異(P>0.05). 2.在卵巢刺激周期中等反應(yīng)和高反應(yīng)組中,子宮內(nèi)膜的胞飲突形態(tài)不典型或缺如,子宮內(nèi)膜整合素β3和LIF表達(dá)均低于自然周期(P<0.05),卵巢高反應(yīng)者的子宮內(nèi)膜腺體LIF表達(dá)強(qiáng)度較中等反應(yīng)者顯著降低 (

6、P<0.05). 3.經(jīng)過(guò)基因芯片檢測(cè),在卵巢高反應(yīng)者圍著床期子宮內(nèi)膜的基因表達(dá)譜中,有364個(gè)基因表達(dá)變化在2倍以上,其中233個(gè)基因上調(diào),131個(gè)基因下調(diào).通過(guò)PANTHER數(shù)據(jù)庫(kù)的生物學(xué)過(guò)程分析,說(shuō)明可能通過(guò)增強(qiáng)信號(hào)傳導(dǎo),調(diào)節(jié)免疫等生物學(xué)過(guò)程來(lái)適應(yīng)超生理激素狀態(tài).同時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證了部分與子宮內(nèi)膜功能相關(guān)的基因 (Mucin-1,OPN,IGFBP5,DPPIV,PLA2G2,SAT和IL6ST等),它們的變化可能與高