中藥黃嘌呤氧化酶抑制劑的篩選及抑制動力學(xué)研究.pdf

1、近年來，痛風(fēng)和高尿酸血癥的發(fā)病率呈現(xiàn)不斷上升的趨勢。黃嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase，EC1.2.3.2)是尿酸代謝過程中一種極重要的酶，它能催化體內(nèi)的次黃嘌呤和黃嘌呤產(chǎn)生尿酸。通過抑制黃嘌呤氧化酶的活性，可以使體內(nèi)的尿酸含量降低。黃嘌呤氧化酶抑制劑是治療高尿酸血癥和痛風(fēng)的主要藥物，臨床上使用最多的別嘌呤醇，但是這類藥物有較大的副作用，因此尋找新的黃嘌呤氧化酶抑制劑藥物非常重要。我國有著非常豐富的中藥資源和使用歷史，從其中

2、尋找黃嘌呤氧化酶抑制劑可以為以黃嘌呤氧化酶為靶點的抗痛風(fēng)藥物或保健食品開發(fā)提供理論依據(jù)。
　　本文選取了17種中藥，對其水提物和醇提取物進(jìn)行體外黃嘌呤氧化酶抑制實驗，篩選出6種水提物和6種醇提物，分析其抑制機(jī)制，并對其標(biāo)志性成分進(jìn)行抑制動力學(xué)的分析。
　　建立體外黃嘌呤氧化酶的篩選體系，檢測方法是紫外分光光度法，反應(yīng)體系的檢測波長為295nm。
　　本論文分析了同一水提條件下的17種水提物對黃嘌呤氧化酶的抑制活性。結(jié)果

3、顯示：濃度為5mg/mL時，有11種水提物表現(xiàn)出對黃嘌呤氧化酶的抑制活性，其中蛹蟲草、葛根、山楂、菊花、蒲黃、荷葉、三七、訶子的水提物都表現(xiàn)出較好的抑制效果。
　　對同一醇提條件下的17種醇提物對黃嘌呤氧化酶的抑制活性。結(jié)果顯示：濃度為5mg/mL時，有14種醇提物表現(xiàn)出對黃嘌呤氧化酶的抑制活性，而蛹蟲草、葛根、銀杏葉、山楂、菊花、荷葉、三七、訶子的醇提物都表現(xiàn)出較好的抑制效果。
　　確定訶子、蛹蟲草、葛根、山楂、荷葉、三七

4、這6種水提物的抑制作用和抑制類型，結(jié)果顯示：訶子、蛹蟲草、葛根、三種物質(zhì)的水提物的半抑制濃度IC50分別是3.87mg/mL、6.45mg/mL、5.54mg/mL，荷葉、山楂、三七的水提物屬于較為溫和的黃嘌呤氧化酶抑制劑，其對XO的抑制率均在50％以下。這六種中藥水提物對XO的抑制均屬于線性競爭性抑制，其中葛根、蛹蟲草、訶子水提物的Ki分別為1.96mg/mL、2.61mg/mL、2.17mg/mL，荷葉、三七、山楂水提物的抑制常數(shù)K

5、i分別為52.48mg/mL、39.8mg/mL、50.9mg/mL。
　　對訶子、蛹蟲草、葛根、山楂、菊花、銀杏葉的醇提物進(jìn)行抑制作用和抑制類型進(jìn)行分析，結(jié)果表明：訶子醇提物對XO屬于反競爭性抑制，IC505.37mg/mL，Ki3.43mg/mL；蛹蟲草醇提物屬于競爭性抑制，IC502.67mg/mL，Ki2.33mg/mL。葛根醇提物屬于競爭性抑制，IC506.36mg/mL，Ki5.96mg/mL；山楂醇提物屬于反競爭性抑

6、制，IC505.23mg/mL，Ki4.03mg/mL；菊花醇提物屬于競爭性抑制，IC507.41mg/mL，Ki3.64mg/mL；銀杏葉醇提物是一種溫和性的黃嘌呤氧化酶抑制劑，屬于競爭性抑制，Ki3.64mg/mL。
　　對蟲草素、葛根素、山楂酸、三七總皂苷、槲皮素進(jìn)行體外黃嘌呤氧化酶的抑制實驗，結(jié)果顯示：山楂酸、三七總皂苷對黃嘌呤氧化酶無抑制作用，葛根素和蟲草素屬于溫和性的黃嘌呤氧化酶抑制劑，槲皮素對黃嘌呤氧化酶有良好的抑制