關(guān)于應(yīng)用循環(huán)腫瘤細(xì)胞無創(chuàng)診斷肺癌的研究.pdf

1、目的：肺癌的發(fā)病率和病死率均明顯增高，發(fā)病率和病死率占所有惡性腫瘤的第1位。本項目擬通過檢測循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）以及血清腫瘤標(biāo)識物，并結(jié)合影像學(xué)分析，對疑似肺癌患者進(jìn)行綜合分析，尋找全新的肺癌無創(chuàng)診斷標(biāo)準(zhǔn)，為肺部陰影的無創(chuàng)診斷提供新的理論依據(jù)和策略。
　　方法：收集2015年7月1日~2016年5月30日來我院住院的肺部陰影待查患者，共200例。所有患者需空腹抽取5ml靜脈血于干燥試管內(nèi)，在4℃條件下，3000 rpm/min離

2、心10min，取上清液（即血清）。采用電化學(xué)發(fā)光法測定血清CYFRA21-1的含量；采用雅培ARCHITECTi2000化學(xué)發(fā)光分析儀及原裝配套試劑測定血清CEA、SCC的含量；將各血清腫瘤標(biāo)識物水平分別或者聯(lián)合與患者最后診斷結(jié)果作相關(guān)分析，查明與肺癌密切相關(guān)的腫瘤標(biāo)識物或標(biāo)識物的組合。磁珠-TM-iFISH法分離和計數(shù)CTC：采用偶聯(lián)了抗人白細(xì)胞表面抗原的特殊單克隆抗體組合群的免疫磁微粒及用于分離非血源性細(xì)胞的特殊離心介質(zhì)，高效、快速

3、地去除腫瘤病人血液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血漿蛋白，從而有效富集病人外周血標(biāo)本中的循環(huán)稀有細(xì)胞，最后，依據(jù)人體外周血CTC判斷標(biāo)準(zhǔn)，即CD-45不表達(dá)和CEP-8信號異常來判斷腫瘤細(xì)胞，確定CTC樣本計數(shù)。所獲取的CTC將進(jìn)一步用于DNA提取及Mass ARRAY DNA質(zhì)譜基因分析，明確腫瘤基因突變情況。
　　結(jié)果：肺癌組與肺良性疾病組血清CYFRA21-1、SCC和CEA含量比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。在肺癌組中，CEA在

4、腺癌組的血清濃度明顯高于鱗癌組（P<0.05），而在鱗癌組，CYFRA21-1及SCC的血清濃度均要高于腺癌組（P<0.05）。肺癌組150例患者中96例CTC陽性（64.0％），其中男性、女性陽性率分別為63.7%，64.6%；從未吸煙者42.4%，曾經(jīng)或正在吸煙者78.0%，兩組間有顯著差異（P<0.01）。腺癌和鱗癌陽性率分別為69.8%和44.1%。肺癌組患者中CTC陽性率為64.0%，而良性肺疾病組患者陽性率為4.00%，兩組

5、間有顯著差異（P<0.01）。
　　結(jié)論：（1）CEA在NSCLC組血清表達(dá)水平明顯高于良性肺疾病組并且在腺癌組中的表達(dá)水平最高，與文獻(xiàn)報道一致。CYFRA21-1和SCC在鱗癌中表達(dá)高，這對肺癌的診斷有一定的提示意義。（2）肺癌患者比良性肺疾病患者更能檢測出CTC，肺部陰影待查患者（懷疑肺癌）盡早檢測CTC對肺癌的診斷有一定輔助作用。（3）檢測CTC的數(shù)量，對監(jiān)測肺癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移均有重要意義，外周血中檢出的CTC的個數(shù)越多說明腫