維甲酸對魚鱗病RARγ、RXRα和角質(zhì)包膜相關蛋白表達的影響.pdf

1、背景：
　　魚鱗病是一種角化異常性遺傳性疾病，其特征是過度角化和鱗屑。目前，魚鱗病最主要的治療藥物為維甲酸。維甲酸類藥物經(jīng)消化吸收后與維甲酸受體相結(jié)合，進而激活維甲酸信號通路而發(fā)生生物學效應。維甲酸受體包括兩類子受體家族即RARs和RXRs，RARs和RXRs分別有3種亞型（α、β、γ），皮膚中主要表達的是RARγ和RXRα。
　　在臨床實踐中，維甲酸類藥物治療魚鱗病存在個體療效上的差異，一部分患者對維甲酸類藥物高度敏感，小

2、劑量的藥物治療就能取得顯著的臨床療效，而有一部分患者對維甲酸類藥物反應差，大劑量的藥物治療其療效仍不滿意。那么這種個體療效上的差異，是否源于個體維甲酸受體的差異呢？目前國內(nèi)外尚無相關報道，本課題就此進行了探索。
　　皮膚角質(zhì)層屏障結(jié)構之一的角化細胞被膜由蛋白包膜和脂質(zhì)包膜兩部分構成，包括角蛋白、絲聚合蛋白、內(nèi)披蛋白、富含脯氨酸的小蛋白、兜甲蛋白。這種結(jié)構十分穩(wěn)定，可以抵抗蛋白酶的水解作用，是皮膚屏障功能的物質(zhì)基礎。
　　目前

3、，我們課題組在魚鱗病領域進行了大量的研究?，F(xiàn)已運用免疫細胞化學SP法和Western﹣blot法檢測RNA干擾（RNAi）技術沉默TGM1基因表達前、后角質(zhì)形成細胞分化標志物K10、內(nèi)披蛋白、絲聚合蛋白及角質(zhì)包膜形成相關的兜甲蛋白和SPRRs的表達差異。結(jié)果顯示：TGM1沉默后細胞K10、兜甲蛋白、SPRRs表達下降，而內(nèi)披蛋白和絲聚合蛋白無明顯改變。為進一步深入研究，本課題擬初步探索3-5例魚鱗病患者皮膚中角質(zhì)化包膜相關蛋白的表達情況

4、，及維甲酸用藥前后維甲酸受體、角質(zhì)包膜相關蛋白的表達情況，以指導后期的細胞和動物實驗。
　　目的：
　　1、觀察魚鱗病患者接受維甲酸治療前后其皮膚中維甲酸受體（RARγ和RXRα）表達是否存在差異，如存在差異，這種差異與療效之間的關系。
　　2、觀察魚鱗病患者皮膚中角質(zhì)包膜相關蛋白（角蛋白10、絲聚合蛋白、兜甲蛋白、內(nèi)披蛋白、富含脯氨酸的小蛋白）表達與正常人群之間是否存在差異，及魚鱗病患者接受維甲酸治療前后其皮膚中角質(zhì)

5、包膜相關蛋白表達是否存在差異。
　　方法：
　　本研究收集3例魚鱗病患者，予以阿維A膠囊治療，使用劑量為0.6﹣0.7mg/kg·d，在用藥前和用藥8周后分別在患者的皮損處和非皮損出取材，運用免疫組化法和Western﹣blot來檢測皮膚中維甲酸受體RARγ和RXRα的表達，運用免疫組化法檢測皮膚中的角質(zhì)包膜相關蛋白（絲聚合蛋白、角蛋白10、兜甲蛋白、內(nèi)披蛋白）的表達，同時選取3例正常人群作對照。最后運用SPSS19.0軟件

6、進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果：
　　1、根據(jù)維甲酸治療魚鱗病的療效，分為療效顯著者和療效一般者。對于療效顯著者，其皮膚中（皮損及非皮損處）維甲酸受體RARγ、RXRα的表達量增多、染色強度增加，即維甲酸受體RARγ、RXRα的蛋白表達量升高，推測對于療效顯著者，維甲酸可能上調(diào)皮膚中RARγ、RXRα的表達。對于療效一般者，其皮膚中（皮損及非皮損處）維甲酸受體RARγ、RXRα的表達量減少、染色強度減弱，即維甲酸受體RARγ、RX

7、Rα的蛋白表達量下降，推測對于療效一般者，維甲酸可能下調(diào)皮膚中RARγ、RXRα的表達。
　　2、正常人群皮膚中角質(zhì)包膜相關蛋白（絲聚合蛋白、角蛋白10、內(nèi)披蛋白、富含脯氨酸的小蛋白）的表達可能高于魚鱗病患者（用藥前后皮損及非皮損處）。在維甲酸治療后，其皮膚中（皮損及非皮損處）絲聚合蛋白、角蛋白10、兜甲蛋白、內(nèi)披蛋白、富含脯氨酸的小蛋白等的表達減少、染色強度減弱，推測維甲酸可能下調(diào)角質(zhì)包膜相關蛋白（絲聚合蛋白、角蛋白10、兜甲蛋