全反式維甲酸對(duì)結(jié)腸癌不同細(xì)胞株HIF-1α表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景和目的：惡性腫瘤的發(fā)生是由于細(xì)胞增殖失控和異常分化的結(jié)果，傳統(tǒng)的腫瘤化學(xué)治療是將腫瘤細(xì)胞殺死，隨著對(duì)腫瘤發(fā)生機(jī)制的深入，誘導(dǎo)分化作為惡性腫瘤全新的治療途徑已經(jīng)引起人們的重視，人們不斷地發(fā)現(xiàn)更有效的誘導(dǎo)分化劑及其藥物作用的新靶點(diǎn)。1986年，我國(guó)在國(guó)際上首先應(yīng)用全反式維甲酸治療急性早幼粒細(xì)胞性白血病的臨床研究，引起了人們對(duì)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化的廣泛注意，為臨床應(yīng)用提供了可能。
　　 有研究表明，全反式維甲酸(ATRA)改善p5

2、3以及相關(guān)下游基因表達(dá)的水平；另一方面，ATRA也能夠促進(jìn)泛素連接酶E3的表達(dá)。以上細(xì)胞因子的相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路，均對(duì)低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α)表達(dá)有抑制作用。因此，本文主要探討全反式維甲酸(All-transRetinoicAcid，ATRA)可以抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖及抑制其HIF-1α表達(dá)的情況。從而提供了維甲酸藥物參與中晚期結(jié)腸癌誘導(dǎo)分化治療，尤其是參與低氧環(huán)境下結(jié)腸

3、癌化療的思路。
　　 方法：本研究中，我們體外培養(yǎng)HCT-8以及LOVO兩種結(jié)腸癌細(xì)胞。以10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L三種不同濃度ATRA干預(yù)，通過形態(tài)學(xué)和MTT觀察兩種細(xì)胞受到ATRA藥物干預(yù)后的增殖情況。在10％O2濃度條件下，使用10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L三種不同濃度的ATRA干預(yù)，與不使用藥物干預(yù)的空白組對(duì)照，檢測(cè)HIF-1α的mRNA轉(zhuǎn)錄以及蛋白表達(dá)的情況，

4、并通過IOD進(jìn)行半定量檢測(cè)，評(píng)估HIF-1α表達(dá)受ATRA藥物抑制的情況。
　　 結(jié)果：1、ATRA作用后，HCT-8及LOVO細(xì)胞增殖均明顯受到抑制。濃度越高細(xì)胞增殖抑制現(xiàn)象越明顯。2、在轉(zhuǎn)錄水平上，我們通過RT-PCR實(shí)驗(yàn)證明兩株體外培養(yǎng)的細(xì)胞表達(dá)HIF-1α受到干預(yù)后表達(dá)明顯降低，并且與ATRA的濃度呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。在HIF-1αmRNA表達(dá)量上HCT-8細(xì)胞比LOVO細(xì)胞受到的影響更明顯。3、在翻譯水平上，我們