維甲酸對(duì)UUO大鼠腎組織RANTES表達(dá)及炎癥反應(yīng)的影響.pdf

1、背景與目的： 大多數(shù)慢性腎臟疾病都存在慢性炎癥反應(yīng)，以腎組織單核巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為特征。慢性炎癥反應(yīng)的結(jié)局是腎組織的進(jìn)行性纖維化，導(dǎo)致腎功能的進(jìn)行性毀損，最終發(fā)展為終末期腎衰。防止和減輕腎臟慢性炎癥反應(yīng)，對(duì)減緩慢性腎臟疾病的發(fā)展有重要意義。 調(diào)節(jié)激活正常T淋巴細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(Regulated on Activation ofNormal T Expressed and Secreted，RANTES)

2、，屬于β亞族趨化因子，通過(guò)廣泛分布于T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面的特異受體CC趨化因子受體5(CC chemokinereceptor5,CCR5)，而使這些炎癥細(xì)胞趨化于炎癥局部并激活，表達(dá)多種炎癥因子，參與腎臟慢性炎癥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制。 維甲酸(Retinoic acid，RA)是維生素A活性代謝產(chǎn)物。在機(jī)體生長(zhǎng)、發(fā)育、分化和凋亡過(guò)程中起重要調(diào)節(jié)作用，近期研究顯示還具有抗炎癥和抗纖維化作用。 本試驗(yàn)擬觀察維甲酸對(duì)單側(cè)輸尿管

3、梗阻(Unilateral ureteral occlusion，UUO)大鼠腎臟趨化因子RANTES及其受體表達(dá)的影響，探討RA對(duì)腎臟炎癥反應(yīng)的抑制作用及其機(jī)制，為慢性腎臟疾病腎組織炎癥反應(yīng)和纖維化的防治尋找新的思路。 方法： 成年清潔級(jí)雄性SD大鼠135只，隨機(jī)分為假手術(shù)組(S組，45只，每濃度亞組15只)，UUO組(U組，45只，每濃度亞組15只)和治療組(T組，45只，每濃度亞組15只)。假手術(shù)組行左輸尿管游離，

4、不結(jié)扎。UUO組和治療組行左輸尿管結(jié)扎。治療組每濃度亞組術(shù)后每天分別給予5、10、20mg/kg全反式維甲酸(ATRA)皮下注射，假手術(shù)組和UUO組各濃度組分別注射同體積溶劑。于術(shù)后第3、7、14天每組取5只大鼠，觀察左側(cè)腎臟腎小管損害、腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度，免疫組化和逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)觀察病變腎組織趨化因子RANTES及其受體CCR5，單核細(xì)胞趨化因子-1(Monocyte chemoattractant protein-1，

5、MCP-1)、單核細(xì)胞炎性因子-1α(Monocyteinflammatory protein-1α，MIP-1α)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(Transforming growth factor-β1，TGF-β1)的表達(dá)。 結(jié)果： 1、假手術(shù)組大鼠腎組織無(wú)明顯病理改變，UUO組大鼠隨著梗阻時(shí)間延長(zhǎng)腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和腎小管損害逐漸加重(P<0.05)，與UUO組相比，同一時(shí)相點(diǎn)的各濃度治療組腎組織病變程度顯著減輕(P<0.

6、05)。 2、維甲酸對(duì)腎組織TGF-β1表達(dá)的影響：假手術(shù)組腎組織幾乎無(wú)TGF-β1蛋白和mRNA表達(dá)。UUO組腎組織于單側(cè)輸尿管梗阻術(shù)后3天即可見(jiàn)TGF-β1mRNA及其蛋白陽(yáng)性表達(dá)，且隨梗阻時(shí)間延長(zhǎng)逐漸加重，到第14天表達(dá)最強(qiáng)(P<0.01)。維甲酸各濃度治療組腎組織TGF-β1 mRNA及其蛋白表達(dá)較UUO組同一時(shí)相點(diǎn)明顯減少(P<0.05)。 3、維甲酸對(duì)腎組織RANTES表達(dá)的影響：假手術(shù)組腎組織幾乎無(wú)RANT

7、ES蛋白和mRNA表達(dá)，UUO組術(shù)后7天出現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)增強(qiáng)(P<0.01)。維甲酸各濃度治療組腎組織RANTES蛋白和mRNA表達(dá)較UUO組同一時(shí)相點(diǎn)明顯減少(P<0.05)。 4、維甲酸對(duì)腎組織CCR5mRNA表達(dá)的影響：假手術(shù)組腎組織幾乎無(wú)CCR5mRNA表達(dá)，UUO組術(shù)后7天出現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)，隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)增強(qiáng)(P<0.01)。維甲酸各濃度治療組腎組織CCR5 mRNA表達(dá)較UUO組同一時(shí)相點(diǎn)明顯減

8、少(P<0.05)。 5、維甲酸對(duì)腎組織MCP-1mRNA表達(dá)的影響：假手術(shù)組腎組織幾乎無(wú)MCP-1mRNA表達(dá)，UUO組術(shù)后7天即有陽(yáng)性表達(dá)，隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)增強(qiáng)(P<0.01)。維甲酸各濃度治療組腎組織MCP-1mRNA表達(dá)較UUO組同一時(shí)相點(diǎn)明顯減少(P<0.05)。 6、維甲酸對(duì)腎組織MIP-1αmRNA表達(dá)的影響：假手術(shù)組腎組織幾乎無(wú)MIP-1αmRNA表達(dá)，UUO組術(shù)后7天出現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)，隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)表

9、達(dá)逐漸增強(qiáng)(P<0.01)。維甲酸各濃度治療組腎組織MIP-1αmRNA表達(dá)較UUO組同一時(shí)相點(diǎn)明顯減少(P<0.05)。 7、各濃度ATRA治療組腎組織病變程度及RANTES、CCR5、MCP-1，MIP-1α和TGF-β1的表達(dá)之間的差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 結(jié)論： 1、隨著梗阻時(shí)間延長(zhǎng)腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和腎小管損害逐漸加重，腎組織RANTES及其受體CCR5、MCP-1，MIP-1α和TGF-β1表達(dá)

10、隨梗阻時(shí)間延長(zhǎng)進(jìn)行性增加，說(shuō)明RANTES、CCR5、MCP-1，MIP-1α和TGF-β1參與了腎臟炎癥反應(yīng)和纖維化的發(fā)病機(jī)制。 2、維甲酸能減少UUO大鼠腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、減輕腎小管損害，抑制RANTES、CCR5、MCP-1，MIP-1α和TGF-β1表達(dá)，從而減輕腎臟炎癥反應(yīng)和纖維化。 3、不同濃度梯度維甲酸治療組腎組織病變程度及RANTES、CCR5、MCP-1，MIP-1α和TFGF-β1的表達(dá)之間的差異無(wú)