CILP2增加氧化低密度脂蛋白誘導的泡沫細胞形成及機制研究.pdf

1、第一部分、CILP2表達上調(diào)對氧化低密度脂蛋白誘導的泡沫細胞形成的影響
　　目的：
　　在體外，建立泡沫細胞模型，探討CILP2表達上調(diào)，是否對氧化低密度脂蛋白誘導的泡沫細胞形成產(chǎn)生影響。
　　方法：
　　用佛波酯（PMA）處理THP-1細胞24小時，誘導成巨噬細胞。誘導成功后與氧化低密度脂蛋白相互作用24小時，在體外建立泡沫細胞模型。用腺病毒載體Ad-CILP2感染巨噬細胞，實時熒光定量PCR（RT-PCR）檢

2、測CILP2表達上調(diào)的效率，油紅染色處理細胞爬片，觀察CILP2表達上調(diào)，對氧化低密度脂蛋白誘導的泡沫細胞形成的影響。
　　結(jié)果：
　　油紅染色結(jié)果顯示泡沫細胞體外模型構(gòu)建成功。利用Ad-CILP2感染細胞后，巨噬細胞內(nèi)CILP2 mRNA水平明顯增高(P＜0.01)，且Ad-CILP2+oxLDL組比Ad-GFP+oxLDL組泡沫細胞形成明顯增多。
　　結(jié)論：
　　CILP2增加氧化低密度脂蛋白誘導的泡沫細胞形

3、成。
　　第二部分、CILP2上調(diào)增加氧化低密度脂蛋白誘導的泡沫細胞形成過程的機制研究
　　目的：
　　探討CILP2上調(diào)增加氧化低密度脂蛋白誘導的泡沫細胞形成過程的可能機制。
　　方法：
　　用熒光標記的氧化型低密度脂蛋白（Dil-oxLDL）作用于巨噬細胞，熒光倒置顯微鏡觀察對脂質(zhì)的攝取情況。利用RT-PCR檢測介導脂質(zhì)攝取的清道夫受體CD36、LOX-1、SR-A mRNA的表達。利用western

4、blot檢測CD36蛋白水平的表達。利用RT-PCR檢測參與膽固醇外流調(diào)節(jié)的ABCA1、ABCG1 mRNA的表達。用PPAR-γ預處理細胞24小時后，利用RT-PCR檢測CD36、LOX-1 mRNA的表達。
　　結(jié)果:
　　CILP2增加熒光標記的氧化型低密度脂蛋白的攝取。與Ad-GFP+oxLDL組比，Ad-CILP2+oxLDL組CD36 mRNA的表達明顯升高(P＜0.01),LOX-1 mRNA的表達明顯升高（P

5、＜0.05），但CILP2表達上調(diào)對SR-A、ABCA1、ABCG1 mRNA的表達無影響。CILP2使CD36蛋白的表達增加(P＜0.01)。巨噬細胞給予PPAR-γ激動劑后，CD36 mRNA的表達升高（P＜0.05）。而給予PPAR-γ抑制劑后，CD36 mRNA的表達降低（P＜0.05）。用PPAR-γ激動劑、抑制劑處理對LOX-1 mRNA的表達無影響。
　　結(jié)論:
　　CILP2通過PPAR-γ信號通路的激活作用