煙草種子油的毒理學評價及降脂功能研究.pdf

1、目的：對煙草種子油的急性毒性、遺傳毒性及30d喂養(yǎng)試驗毒性進行評價，并探討煙草種子油對高脂模型大鼠的降脂作用。
　　方法：
　　1、運用霍恩氏法，對小鼠進行急性經口毒性試驗，計算煙草種子油對小鼠的半數(shù)致死劑量（LD50）。
　　2、采用Ames試驗，觀察不同煙草種子油劑量組對鼠傷寒沙門氏菌回變菌落數(shù)的影響。
　　3、進行骨髓嗜多染紅細胞微核試驗，比較不同煙草種子油劑量組對小鼠微核率的影響。
　　4、采用骨髓

2、嗜多染紅細胞染色體畸變試驗觀察并比較不同劑量煙草種子油小鼠骨髓細胞染色體畸變率的影響。
　　5、健康SD大鼠80只，雌雄各半，按體重隨機分為4組，即空白對照組，煙草種子油低、中、高劑量組（5、10、20g/(kg·bw·d)），每組雌雄各10只，將煙草種子油摻入飼料中，按體重的10％折算，將受試物劑量按每100g體重攝入的量折算為飼料量，每天觀察進食及活動情況，每周稱體重并記錄食物攝入量。30天后，禁食12h，大鼠稱重后給予戊巴比

3、妥鈉60mg/kg麻醉，腹主動脈取血，測定血常規(guī)及血液生化指標；留取完整肝臟、腎、脾、睪丸、卵巢稱重，計算臟體比，HE染色觀察以上組織的病理學改變，觀察有無病變。
　　6、60只SPF級SD大鼠按體重隨機分為5組，A組為基礎對照組，2ml/(kg·bw·d)蒸餾水灌胃；B組為高脂對照組，2ml/(kg·bw·d)蒸餾水灌胃；。C、D、E為煙草種子油低、中、高劑量組，灌胃給予煙草種子油2、4、6ml/(kg·bw·d)，除A組給予基

4、礎飼料喂養(yǎng)外，其余各組均飼喂高脂飼料，共持續(xù)6周。于末次灌胃并禁食12h后，按體重給予戊巴比妥鈉60mg/kg麻醉，測量體長并稱重，計算Lee’s指數(shù)，腹主動脈取血，檢測大鼠血清生化指標的濃度并計算動脈粥樣硬化指數(shù)（AI），分離肝組織及腎周、生殖器周圍、腸系膜周圍脂肪，計算體脂比，留取肝臟組織，HE染色觀察肝臟組織的病理學改變。
　　結果：
　　1、小鼠急性經口毒性試驗：14d內未見有中毒和死亡現(xiàn)象，LD50>21,500m

5、g/kg。
　　2、受試樣品各劑量組回變菌落數(shù)均未超過自發(fā)回變菌落數(shù)2倍，亦無劑量－效應關系，對鼠傷寒沙門氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株試驗菌株，在加與不加S-9時，均未呈現(xiàn)遺傳毒性。
　　3、環(huán)磷酰胺陽性對照組微核率明顯高于陰性對照組(P<0.05)，煙草種子油各劑量組的微核率均低于環(huán)磷酰胺陽性對照組（P<0.05）。
　　4、雌、雄小鼠煙草種子油各劑量組的染色體畸變率相比陽性對照組顯著降低（P<

6、0.05），陽性對照組染色體畸變率相比陰性對照組顯著升高(P<0.05)。
　　5、30d喂養(yǎng)結束后，未見試驗動物有中毒及死亡狀況，體重、食物利用率、臟體比與對照組相比無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)；各組血常規(guī)及血液生化指標ALT、AST、BUN、Cr、GLU、ALB、TP、TC、TG均在正常范圍內，與各自對照組相比無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)；HE染色病理觀察顯示，除高劑量組部分肝組織可見少量脂肪空泡，其余各組大鼠主要臟器

7、未見病理學改變。
　　6、煙草種子油各劑量組脂體比均較高脂模型組有所下降；各組之間Lee’s指數(shù)均無顯著性差異；高脂模型組AI值最高，其余各組AI均顯著降低，且隨著煙草種子油劑量的升高AI值降低程度越大；與高脂模型組相比，煙草種子油低、中、高劑量組TC、LDL-C含量較高脂模型組明顯下降（P<0.05），TG含量較高脂模型組有所下降，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），煙草種子油高劑量組HDL-C較空白對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計學

8、意義，其余各組無統(tǒng)計學差異，HE染色觀察結果顯示煙草種子油干預后，脂變細胞數(shù)量、脂肪空泡、炎性浸潤及核溶解較高脂對照組明顯減輕。
　　結論：
　　1、根據(jù)對煙草種子油的急性經口毒性試驗、三項遺傳毒性實驗及30d喂養(yǎng)試驗的結果，證實煙草種子油在本實驗范圍內無明顯毒作用。
　　2、通過對高脂模型大鼠血生化指標的檢測及病理學觀察，證實煙草種子油具有一定的降脂活性。
　　3、通過對煙草種子油的毒理學評價及降脂實驗，結果表