TRIM59和COMMD9促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌增殖和遷移的分子機(jī)制研究.pdf

1、分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：355628813020南昌大學(xué)博士研究生學(xué)位論文TRIM59和COMMD9促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌增殖和遷促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌增殖和遷移的移的分子機(jī)制研究分子機(jī)制研究TRIM59COMMD9promotesproliferationmigrationinnonsmallcelllungcancer詹偉華培養(yǎng)單位（院、系）：生命科學(xué)學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：王建斌教授申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：理學(xué)專業(yè)領(lǐng)域名稱：生物學(xué)論文答辯日期

2、：2016年12月答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：2016年12月12日摘要I摘要第一部分第一部分TRIM59促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌增殖和遷移促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌增殖和遷移研究目的研究目的：TRIM家族是一類在炎癥、免疫、抗病毒和癌癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有重要作用超家族蛋白。作為TRIM家族的一員，之前有文獻(xiàn)報(bào)道TRIM59通過(guò)泛素化p53促進(jìn)胃癌的發(fā)生發(fā)展，但是TRIM59在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中的生理學(xué)功能和作用機(jī)制并不清楚。本課題通過(guò)QPCR方法，

3、得到TRIM蛋白家族成員在非小細(xì)胞肺癌中的mRNA表達(dá)情況。進(jìn)一步探討TRIM59對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移和細(xì)胞周期的影響及其作用機(jī)制。研究方法研究方法：1、用QPCR方法篩選4株非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞（H1299，A549，SPCA1和H292）相對(duì)于正常人類支氣管上皮細(xì)胞（HBE）中差異表達(dá)的TRIM基因。2、在蛋白水平上驗(yàn)證各株細(xì)胞中TRIM59表達(dá)情況，并且檢測(cè)其在14種人類正常組織中的表達(dá)情況。3、在轉(zhuǎn)染TRIM59特異性siR

4、NA情況下，通過(guò)飽和密度實(shí)驗(yàn)、低血清實(shí)驗(yàn)、克隆集落形成實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)干擾TRIM59表達(dá)對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移和細(xì)胞周期的影響。4、降低TRIM59表達(dá)水平，然后進(jìn)行QPCR實(shí)驗(yàn)，免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白和p53蛋白表達(dá)情況。研究結(jié)果研究結(jié)果：1、相比于HBE細(xì)胞，在4株NSCLC細(xì)胞中TRIM3、TRIM7、TRIM14、TRIM16、TRIM21、TRIM22、

5、TRIM29、TRIM59、TRIM66和TRIM70高表達(dá)，TRIM4、TRIM9、TRIM36、TRIM46、TRIM54、TRIM67和TRIM76低表達(dá)。而TRIM17、TRIM40、TRIM42、TRIM43、TRIM48、TRIM49、TRIM50、TRIM51、TRIM60、TRIM63、TRIM64和TRIM77在NSCLC細(xì)胞和HBE細(xì)胞中未檢測(cè)到。2、相比于HBE細(xì)胞，TRIM59蛋白在4株NSCLC細(xì)胞中高表達(dá)。T