TRIM29對(duì)人非小細(xì)胞肺癌遷移能力的影響及作用機(jī)制.pdf

1、背景：
　　肺癌是全球發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，其死亡人數(shù)占世界癌癥死亡的1/4，而非小細(xì)胞肺癌約占肺癌總數(shù)的85％，其中由于腫瘤轉(zhuǎn)移導(dǎo)致的死亡率高達(dá)90%，對(duì)
　　肺癌進(jìn)展的分子機(jī)制研究有助于為肺癌治療提供新的靶點(diǎn)。以往研究表明肺癌組織中 TRIM29呈現(xiàn)高表達(dá)，但與其有關(guān)的作用機(jī)制研究仍較少。2014年，Ai等在乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn) TRIM29與 Twist1之間存在互相調(diào)節(jié)的作用，從而影響腫瘤細(xì)胞的遷移能力。為研究

2、 TRIM29對(duì)人非小細(xì)胞肺癌遷移能力的影響，本研究選取具有人非小細(xì)胞肺癌特性的A549細(xì)胞株作為研究對(duì)象，探討 TRIM29沉默對(duì)肺癌細(xì)胞遷移能力及相關(guān)蛋白Twist1、E-cadherin表達(dá)的影響。
　　目的：
　　探討TRIM29對(duì)人非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞株遷移能力的影響，并探討TRIM29促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移的機(jī)制。
　　方法：
　　1、采用RNAi技術(shù)和病毒介導(dǎo)法構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)TRIM29shRNA的

3、A549細(xì)胞株；
　　2、Real-time PCR及Western-blotting檢測(cè)siRNA干擾后TRIM29基因及蛋白表達(dá)情況；3、Transwell小室法檢測(cè)siRNA干擾后肺腺癌A549細(xì)胞株遷移能力的改變；
　　4、Western-blotting檢測(cè) siRNA干擾后肺腺癌 A549細(xì)胞中 Twist1蛋白、E-cadherin蛋白表達(dá)的變化情況。
　　結(jié)果：
　　1、將 TRIM29shRNA

4、及陰性對(duì)照 TRIM29shRNA導(dǎo)入肺腺癌 A549細(xì)胞中，Real-time PCR及 Western-blotting檢測(cè) siRNA干擾后 TRIM29基因及蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果顯示：與空白組和對(duì)照組相比，siRNA處理組A549細(xì)胞中TRIM29的mRNA表達(dá)量無(wú)明顯改變，但其蛋白表達(dá)量卻明顯下降。
　　2、Transwell小室法檢測(cè)siRNA干擾后肺腺癌A549細(xì)胞的遷移能力，結(jié)果顯示：與空白組和對(duì)照組相比，TR

5、IM29shRNA處理組A549細(xì)胞遷移能力明顯減弱。
　　3、Western-blotting檢測(cè)不同處理組細(xì)胞中Twist1蛋白、E-cadherin蛋白表達(dá)的變化情況，以進(jìn)一步探討 TRIM29在促進(jìn)肺腺癌 A549細(xì)胞遷移的可能機(jī)制。結(jié)果顯示：隨著TRIM29蛋白表達(dá)下調(diào)，Twist1表達(dá)量下降、E-cadherin表達(dá)量升高。
　　結(jié)論：
　　本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究TRIM29對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞株遷移能力的影響，并