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1、本論文從培養(yǎng)人參的土壤中篩選出23株菌。能夠轉(zhuǎn)化三七中人參皂苷為稀有、高活性人參皂苷的微生物菌株有9株,其中以菌株TR—20的轉(zhuǎn)化作用最強(qiáng)。 本論文用薄層層析法和高效液相色譜法定性、定量分析三七中人參皂苷及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。最終確定了較為適宜的薄層層析展開(kāi)劑:氯仿:甲醇:水=40:10:1;并且建立了最佳的HPLC檢測(cè)條件:色譜柱:Phenomex C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:乙腈(A):水(B),梯度洗脫。柱
2、溫:30℃;檢測(cè)波長(zhǎng):203nm;流速:1.0ml/min;進(jìn)樣量20μl。 通過(guò)對(duì)菌株TR—20的形態(tài)和培養(yǎng)特征觀察,結(jié)合分子生物學(xué)方法進(jìn)行鑒定,鑒定結(jié)果為:菌株TR—20屬于半知菌綱(Fungi Imperfecti)、殼霉目(Sphaeropsidales)、杯霉科(Discellaceae)、棒曲霉屬(Aspergillus sp)。 利用C18反相柱層析和硅膠柱層析兩個(gè)方法相結(jié)合,分離得到2個(gè)純度較高的目的樣
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