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文檔簡介
1、目的:
研究乙型肝炎相關(guān)性肝癌細(xì)胞Hep3B在ISG15蛋白表達(dá)被干擾后,其增殖、遷移、侵襲、凋亡、周期的變化。
方法:
1、將表達(dá)shRNA的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入Hep3B細(xì)胞。2、干擾ISG15蛋白表達(dá)前后細(xì)胞增殖能力的改變情況利用CCK-8檢測(cè)試劑及酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。3、干擾ISG15蛋白表達(dá)前后細(xì)胞侵襲和遷移能力的變化利用Transwell小室及人造基底膜檢驗(yàn)。4、干擾ISG15蛋白表達(dá)前后細(xì)胞凋亡特點(diǎn)和細(xì)胞周
2、期的改變的檢測(cè)通過流式細(xì)胞儀完成。
結(jié)果:
1、ISG15蛋白的表達(dá)被干擾后,Hep-3B細(xì)胞的增殖能力明顯地受到抑制(P<0.01)。2、干擾ISG15蛋白的表達(dá)導(dǎo)致Hep-3B細(xì)胞的遷移能力、侵襲能力均顯著減弱( P<0.01)。3、干擾ISG15蛋白的表達(dá)能促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡(P<0.01),而且以早期凋亡為主。4、ISG15蛋白的表達(dá)被干擾后,處于S期的Hep-3B細(xì)胞比例明顯上升,G1期細(xì)胞比例降低(P<0.
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