細(xì)胞周期相關(guān)蛋白ZYG11A促進肺腺癌惡性進展的機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文通過以下幾個部分展開論述:
  第一部分:ZYG11A在非小細(xì)胞肺癌中被識別為一個潛在的癌基因
  目的:肺癌目前是全世界最流行的腫瘤,每年造成大量患者死亡。即使患者接受了規(guī)范化治療,在大多數(shù)國家里五年生存率仍然小于15%。因此尋找肺癌相關(guān)標(biāo)記物和治療靶點顯得尤為重要。近年來隨著高通量測序技術(shù)的發(fā)展與普及,以及許多公開腫瘤學(xué)數(shù)據(jù)庫的涌現(xiàn),使得這項工作顯得更為方便簡單。
  方法:通過使用TCGA的肺癌,肺腺癌,肺鱗

2、癌數(shù)據(jù)庫從約20000個基因中篩選差異表達最大的基因。對于腫瘤和瘤旁差異表達大于5倍的和腫瘤中表達大于3的基因再進行文獻閱讀篩選。之后使用The Human Protein Atlas評估篩選出來的基因在組織中蛋白表達情況。
  結(jié)果:通過TCGA數(shù)據(jù)庫的篩選,我們一共識別出了7個符合條件的基因,通過在PubMed和谷歌學(xué)術(shù)上檢索我們發(fā)現(xiàn)PITX2,HOXC13和BARX1都屬于轉(zhuǎn)錄因子,并且在腫瘤中已經(jīng)被很好的研究過了。DLL3

3、作為一個Notch的配體在腫瘤中也被研究過了。LOC100131726是一個長鏈非編碼RNA。IL1F5屬于白介素1家族在牛皮癬的發(fā)病中被廣泛研究。只有ZYG11A目前被研究甚少。
  第二部分:ZYG11A在非小細(xì)胞肺癌中的體內(nèi)外功能實驗和相關(guān)機制探索
  目的:根據(jù)之前的分析,ZYG11A可能是一個潛在的癌基因,本研究旨在探索ZYG11A和非小細(xì)胞肺癌相關(guān)惡性表型的關(guān)系及其可能機制,為肺癌防治提供潛在新靶點。
  

4、方法:首先使用qRT-PCR和Western blot檢測ZYG11A在各個細(xì)胞中的表達情況,并選擇合適的細(xì)胞系進一步進行相關(guān)表型研究。我們選擇H1299和SPC-A-1進行了相關(guān)的體內(nèi)外表型研究。設(shè)計特異性siRNA干擾ZYG11A的表達,之后檢測細(xì)胞的增殖,遷移,侵襲能力,以及凋亡情況和細(xì)胞周期分布。
  結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)外干擾ZYG11A的表達可以顯著的抑制腫瘤細(xì)胞的相關(guān)惡性表型,影響到CCNE1的表達,從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞

5、的G1期阻滯,我們通過拯救試驗過表達CCNE1可以恢復(fù)腫瘤的相關(guān)惡性表型。
  第三部分:ZYG11A在非小細(xì)胞肺癌中的預(yù)后價值
  目的:探索ZYG11A在肺癌中是否可以作為一個獨立的預(yù)后因素,并且探索ZYG11A和其他臨床參數(shù)之間的相關(guān)性。
  方法:我們使用了90對來自于上海芯超公司的非小細(xì)胞肺癌組織芯片進行ZYG11A的免疫組織化學(xué)染色。染色后對染色結(jié)果進行評分,然后運用相關(guān)的統(tǒng)計學(xué)方法探索ZYG11A的表達和

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