年輕乳腺癌細胞周期相關(guān)基因的QM-FISH分析.pdf

1、目的:
　　1.探索研究細胞周期相關(guān)基因拷貝數(shù)變化(copy number aberrations，CNAs)在年輕乳腺癌與老年乳腺癌患者中的變異情況。
　　2.探討分析年輕乳腺癌與老年乳腺癌患者細胞周期相關(guān)基因拷貝數(shù)變化情況與臨床病理資料之間的相關(guān)性。
　　3.探討分析細胞周期相關(guān)基因基因拷貝數(shù)變化情況與預后關(guān)系，以期發(fā)現(xiàn)與年輕乳腺癌預后相關(guān)基因拷貝數(shù)變化，進而為臨床預后判斷及相關(guān)靶點治療提供依據(jù)。
　　方法:

2、
　　1.收集2006年01月到2007年12月在天津腫瘤醫(yī)院收治的經(jīng)病理學證實的年輕女性乳腺癌（年齡≤35歲）196例和老年女性乳腺癌（年齡≥65歲）227例患者的臨床資料，收集兩組病人的診斷時切除的腫瘤石蠟病理標本及病理檢查結(jié)果。利用定量多基因熒光原位雜交(Quantitative Multi-geneFluorescence In Situ Hybridization，QM-FISH)技術(shù)對病人石蠟切片進行基因雜交，以檢測分

3、別用PromoFluor-415-aadUTP(Blue)、PromoFluor-555-aadUTP(Orange)、PromoFluor-590-aadUTP(Red)、Green dUTP(Green)4種熒光素標記的基因CCND1、基因Rb1、基因c-Myc和基因CHEK2在年輕乳腺癌和老年乳腺癌患者中的基因拷貝數(shù)變化情況。
　　2.數(shù)據(jù)統(tǒng)計學處理采用SPSS17.0和Graphpad6.0統(tǒng)計軟件和作圖軟件進行數(shù)據(jù)分析及

4、圖表制作。計數(shù)資料采用兩獨立樣本的x2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。預后生存分析采用Kaplan-Meier法進行單因素生存分析，采用Log-rank進行檢驗;以Cox比例風險模型進行多因素分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　1.年輕乳腺癌患者腫瘤體積較大(P=0.028)，容易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.009)，有家族史者較老年乳腺癌患者多(P=0.026)。在分子分型比較中，三陰性乳腺癌(t

5、riple negative breast cancer, TNBC)在年輕乳腺癌患者中所占比例明顯高于老年乳腺癌患者，分別為18.4％和10.6％。在5-DFS方面，年輕乳腺癌患者容易出現(xiàn)復發(fā)或轉(zhuǎn)移(P=0.0047)，而在5-OS方面，老年乳腺癌患者有較好的預后趨勢，但是差異沒有統(tǒng)計學意義(P=0.0743)
　　2.Rb1、CHEK2和c-Myc基因的拷貝數(shù)變化情況與年齡具有明顯相關(guān)（依次P=0.000，0.000，0.00

6、0），而基因CCND1的擴增突變與年齡無明顯相關(guān)(P=0.891)。年輕組患者中Luminal A型、Luminal B型和TNBC三種分子分型中CNAs的情況與年齡較小密切相關(guān)（依次P=0.000，0.000，0.003），而Her-2過表達型乳腺癌患者中CNAs與年齡無明顯相關(guān)(P=0.142)。
　　3.發(fā)生基因CCND1擴增和基因Rb1缺失的年輕乳腺癌患者預后較差(P＜0.001);發(fā)生c-Myc基因擴增的老年乳腺癌患者預

7、后較差(P＜0.001);發(fā)生CHEK2基因缺失的兩組患者預后均較差(P＜0.001)。年輕乳腺癌患者的Cox多因素分析顯示，基因CHEK2缺失、ER陽性、Ki67、分子分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是年輕乳腺癌患者5-DFS的獨立預后影響因素（依次為P=0.014，HR=2.111,95％CI:1.166-3.822; P=0.024, HR=0.520,95％CI:0.295-0.918;P=0.044, HR=1.894,95％CI:1.018

8、-3.524; P=0.039, HR=1.942,95％CI:1.003-4.931;P=0.000，HR=9.348，95％CI:3.625-24.106）;在對年輕乳腺癌患者5-OS的分析中，Ki67、分子分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是年輕乳腺癌患者5-OS的獨立預后影響因素（依次為P=0.079，HR=2.069，95％CI:0.920-4.657;P=0.042, HR=1.975,95％CI:1.002-3.962; P=0.001,

9、HR=26.294,95％CI:3.534-195.610)。
　　結(jié)論:
　　1.年輕乳腺癌癌患者腫瘤惡性程度較高，容易出現(xiàn)復發(fā)轉(zhuǎn)移，預后較差。
　　2.年輕乳腺癌患者出現(xiàn)Rb1、CHEK2和c-Myc基因拷貝數(shù)變化的頻率較高。分子分型中的Luminal A型、Luminal B型和TNBC三種亞型中CNAs的變異頻率與年齡相關(guān)。
　　3.四種細胞周期相關(guān)基因(CCND1、Rb1、c-Myc、CHEK2)發(fā)生C