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文檔簡介
1、研究目的:本課題旨在探索p65/miR-23a-27a-24對急性髓性白血病的調(diào)控及其在急性髓性白血病發(fā)生發(fā)展中的作用,為急性髓性白血病的治療提供新的理論基礎(chǔ)和潛在的治療靶點。
研究方法:
分別用Western blot和Realti me PCR技術(shù)檢測急性髓性白血病細(xì)胞、白血病病人外周血單核細(xì)胞p65及mi R-23a-27a-24的表達(dá)水平。以抗白血病藥物誘導(dǎo)急性髓性白血病細(xì)胞分化后,檢測p65及mi R-23
2、a-27a-24的水平變化。抑制p65或miR-23a-27a-24水平后觀察急性髓性白血病細(xì)胞的分化水平。構(gòu)建白血病小鼠動物模型,研究p65及miR-23a-27a-24對白血病小鼠生存期或者腫瘤擴散的影響。應(yīng)用生物信息學(xué)軟件結(jié)合分子手段探索p65對miR-23a-27a-24的調(diào)節(jié)作用,并在細(xì)胞和動物水平驗證p65/miR-23a-27a-24調(diào)控軸作用。
研究結(jié)果:
本課題發(fā)現(xiàn)p65在急性髓性白血病細(xì)胞分化后表
3、達(dá)水平降低,抑制p65水平可以促進(jìn)白血病細(xì)胞分化成熟,并且檢測到臨床急性髓性白血病細(xì)胞(AML)和急性早幼粒細(xì)胞(APL)患者外周血單核細(xì)胞 p65水平較高。通過軟件預(yù)測并結(jié)合CHIP實驗證實p65直接結(jié)合miR-23a-27a-24的啟動子。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)miR-23a-27a-24在急性髓性白血病細(xì)胞分化后表達(dá)水平降低,抑制miR-23a-27a-24可以促進(jìn)急性髓性白血病細(xì)胞分化成熟,同時檢測到臨床AML和APL患者外周血單核細(xì)胞
4、miR-23a-27a-24水平較高,過表達(dá)miR-23a-27a-24會促進(jìn)白血病小鼠發(fā)生腫瘤擴散。深入研究發(fā)現(xiàn)miR-23a-27a-24 mi mics能夠在細(xì)胞水平影響p65對成熟紅系蛋白的調(diào)節(jié)作用,并且p65抑制劑可以延長白血病小鼠的生存期,促進(jìn)白血病細(xì)胞分化以及減少腫瘤肝臟擴散,而miR-23a-27a-24 mi mics能夠影響p65抑制劑的治療效果。
研究結(jié)論:
持續(xù)升高的p65/miR-23a-2
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