二甲雙胍抑制IGF-1R信號(hào)通路逆轉(zhuǎn)ALK+肺癌細(xì)胞對(duì)克唑替尼的獲得性耐藥.pdf

1、ALK間變性淋巴瘤激酶基因的突變?cè)诤芏鄲盒阅[瘤中都會(huì)發(fā)生，2007年，Soda等人在非小細(xì)胞肺癌中發(fā)現(xiàn)，ALK基因可以和棘皮動(dòng)物微管相關(guān)蛋白樣4基因融合，形成EML4-ALK融合基因。該融合基因的編碼產(chǎn)物，具有強(qiáng)烈的促惡性變和致癌效應(yīng)。發(fā)生ALK突變的腫瘤組織的生長(zhǎng)，侵襲，遷移等都依賴于ALK信號(hào)通路的持續(xù)活化，而該信號(hào)通路可以被ALK酪氨酸激酶抑制劑很好的抑制。
　　克唑替尼是針對(duì)ALK，MET，ROS1等的多靶點(diǎn)酪氨酸激酶抑制

2、劑，它對(duì)有ALK+的NSCLC患者的治療效果超過(guò)了傳統(tǒng)的化療藥物。近來(lái)，PROFILE1014等臨床試驗(yàn)的研究結(jié)果顯示:將克唑替尼作為一線治療藥物治療ALK+NSCLC患者，能顯著的改善患者的PFS和ORR，從而將克唑替尼作為治療之前未接受過(guò)克唑替尼治療的ALK+NSCLC患者的標(biāo)準(zhǔn)方案，該方案同時(shí)具有良好的安全效應(yīng)。但是，讓人遺憾的是，在幾乎所有的接受治療的患者中，最終不可避免的出現(xiàn)了獲得性耐藥，限制了克唑替尼的臨床使用。因此，克服克

3、唑替尼的獲得性耐藥的治療策略成為迫切的需要。
　　目前，針對(duì)克唑替尼獲得性耐藥的機(jī)制研究尚未完全闡明，類似于EGFR-TKI獲得性耐藥的看家基因T790M突變，包括L1196M，L1152R，C1156Y, and F1174L等突變?cè)诳诉蛱婺崮退幍臉颖局斜活l頻發(fā)現(xiàn)，此外，IGF-1R信號(hào)通路也被報(bào)道與克唑替尼耐藥相關(guān)，長(zhǎng)期抑制ALK酪氨酸激酶，會(huì)導(dǎo)致IGF-1R信號(hào)通路的活化，同時(shí)，聯(lián)合IGF-1R抑制劑可以使已經(jīng)耐藥的細(xì)胞恢復(fù)

4、對(duì)克唑替尼的敏感性。因此，IGF-1R信號(hào)通路成為ALK+NSCLC的潛在治療標(biāo)靶。
　　二甲雙胍是一種經(jīng)典降糖藥物，其在臨床上的運(yùn)用已經(jīng)超過(guò)40多年，此外，有報(bào)道指出，使用二甲雙胍的患者，其腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)和預(yù)后均顯著優(yōu)于未接受二甲雙胍治療的患者，從而使許多研究者關(guān)注其抗腫瘤效應(yīng)。我們之前的研究中曾發(fā)現(xiàn)，二甲雙胍聯(lián)合吉非替尼或厄洛替尼，對(duì)EGFR-TKI耐藥細(xì)胞株的增殖，遷移和侵襲均有顯著的協(xié)同抑制效應(yīng)。但是二甲雙胍能否克服克唑替

5、尼的耐藥卻仍是未知數(shù)，有趣的是，二甲雙胍還被報(bào)道過(guò)具有抑制IGF-1R信號(hào)通路的效應(yīng)。這些研究發(fā)現(xiàn)啟示我們，是否能夠?qū)⒍纂p胍與克唑替尼聯(lián)合使用，通過(guò)二甲雙胍抑制IGF-1R信號(hào)通路的效應(yīng)，從而克服克唑替尼的獲得性耐藥。
　　在我們的研究中展示了二甲雙胍聯(lián)合克唑替尼能夠在克唑替尼敏感的H2228和H3122以及克唑替尼耐藥的H2228-CR和H3122-CR細(xì)胞中，對(duì)細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲等的抑制上具有協(xié)同效應(yīng)。二甲雙胍所發(fā)揮的增

6、敏效應(yīng)歸因于其抑制IGF-1R信號(hào)通路的活化，我們提供了理論性的和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)了二甲雙胍聯(lián)合克唑替尼能夠克服ALK+NSCLC對(duì)克唑替尼的耐藥。
　　目的:
　　盡管克唑替尼對(duì)ALK+NSCLC患者的治療效果顯著，但是患者最終幾乎難以避免的會(huì)出現(xiàn)獲得性耐藥，有研究報(bào)道通過(guò)抑制IGF-1R信號(hào)通路的活化能夠克服對(duì)克唑替尼的耐藥。
　　方法:
　　通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)，侵襲實(shí)驗(yàn)，KI67實(shí)驗(yàn)，流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，Western

7、Blot實(shí)驗(yàn)和克隆形成實(shí)驗(yàn)等體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)二甲雙胍能夠逆轉(zhuǎn)克唑替尼的耐藥
　　結(jié)果:
　　研究揭示了二甲雙胍這種廣泛運(yùn)用于臨床的降糖藥物，能夠有效的增強(qiáng)ALK+肺癌克唑替尼敏感和耐藥細(xì)胞對(duì)克唑替尼的敏感性，其具體證據(jù)表現(xiàn)在抑制細(xì)胞的增殖和侵襲，同時(shí)增強(qiáng)細(xì)胞凋亡等。二甲雙胍抑制IGF-1R信號(hào)通路的活化，還能夠因此克服外加IGF-1誘導(dǎo)的對(duì)克唑替尼的耐藥。
　　結(jié)論:
　　對(duì)ALK+NSCLC患者來(lái)說(shuō)，二甲雙胍與克唑