上臨界溶解溫度型膠束給藥系統(tǒng)的腫瘤靶向治療研究.pdf

1、刺激響應(yīng)型聚合物納米給藥系統(tǒng)，是指對(duì)某種或幾種特定的外界環(huán)境刺激，比如pH，溫度，酶及光等產(chǎn)生響應(yīng)，破壞給藥系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，從而實(shí)現(xiàn)藥物的刺激響應(yīng)型釋放。在這些刺激響應(yīng)型聚合物納米給藥系統(tǒng)中，溫度敏感型聚合物納米給藥系統(tǒng)得到了廣泛的關(guān)注，這可能是由于對(duì)腫瘤部位的溫度刺激一方面可以輔助藥物從聚合物納米給藥系統(tǒng)中的快速釋放，提高化療療效，另一方面高溫本身也可以實(shí)現(xiàn)腫瘤的熱療。本研究主要內(nèi)容包括：
　?、爬米杂苫酆虾铣闪艘环N具有上

2、臨界溶解溫度的聚合物聚（丙烯酰胺-丙烯腈），并考察了聚合物的組成及分子量對(duì)其上臨界溶解溫度的影響:當(dāng)聚合物中丙烯腈的比例從10.7％增大到24.4％mol時(shí)，該聚合物的上臨界溶解溫度相應(yīng)地從28℃增大到56℃。而當(dāng)聚合物的分子量從51.3 kDa降低到14.6 kDa時(shí)，該聚合物的上臨界溶解溫度相應(yīng)地從83℃降低到30℃。然后，進(jìn)一步將聚乙二醇化學(xué)嫁接到聚（丙烯酰胺-丙烯腈）上，得到在聚合物上臨界溶解溫度以下具有兩親性的的聚（丙烯酰胺-

3、丙烯腈）-聚乙二醇，并考察了不同鏈長(zhǎng)度及嫁接密度的聚乙二醇對(duì)聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇自聚集行為的影響:當(dāng)聚乙二醇中乙二醇的重復(fù)單元為33，83和186時(shí)，聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇的臨界自聚集濃度相應(yīng)為128.8μg/mL，30.2μg/mL和420.8μg/mL。另外當(dāng)聚乙二醇的嫁接密度（聚乙二醇/每摩爾嫁接物，mol/mol）為0.5，4.8和7.2時(shí)，聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇的臨界自聚集濃度相應(yīng)為71.7μg

4、/mL，30.2μg/mL和365.9μg/mL。以乙二醇重復(fù)單元為83的聚乙二醇對(duì)丙烯腈的組成比例為19.0％mol，分子量為32.5 kDa的聚（丙烯酰胺-丙烯腈）進(jìn)行4.8 mol/mol的修飾可得上臨界溶解溫度為43℃并且臨界自聚集濃度在30.2μg/mL的聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇，應(yīng)用于后續(xù)研究。
　?、凭?聚乙二醇膠束可以有效包裹阿霉素，載藥前后，都表現(xiàn)出了較為均一的粒徑分布，粒徑在50 nm左右。聚（丙烯酰胺

5、-丙烯腈）-聚乙二醇載藥膠束表現(xiàn)出了溫度觸發(fā)的藥物釋放行為，在43℃時(shí)，48 H內(nèi)有接近80％的藥物被釋放，而在37℃時(shí)，48 H內(nèi)只有40％的藥物被釋放。該聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇載藥膠束可以被肝癌BEL-7402細(xì)胞有效攝取并且經(jīng)過(guò)43℃處理0.5H后，抗腫瘤療效相對(duì)于沒(méi)有經(jīng)過(guò)43℃處理而言，得到顯著提高(IC50:1.6 vs3.2μg/mL)。另外，該聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇載藥膠束在尾靜脈給藥24 H后，可以有

6、效聚集到腫瘤部位。輔以微波熱療之后，腫瘤部位的溫度在5 min之內(nèi)升高6℃，腫瘤抑制率達(dá)到了92.8％，并且有50％的實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的腫瘤完全消失，也沒(méi)有出現(xiàn)后期腫瘤復(fù)發(fā)現(xiàn)象。而只經(jīng)過(guò)聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇載藥膠束處理而沒(méi)有輔以微波熱療組，腫瘤抑制率只有55.6％。
　　⑶BEL-7402肝癌靶向多肽A54化學(xué)修飾到聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇膠束表面，得到的A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）膠束能夠有效包裹阿霉素

7、，進(jìn)一步包裹磁性納米粒，可以得到A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥磁性膠束。該載藥磁性膠束表現(xiàn)出了較為均一的粒徑分布，粒徑位于120 nm。A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥磁性膠束的微波產(chǎn)熱效率相對(duì)于A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥膠束組得到提高:微波處理30 min后，溫度升高率分別為170％和120％。該A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙二醇載藥磁性膠束表現(xiàn)出了微波觸發(fā)的，溫度敏感型藥物

8、釋放行為，經(jīng)過(guò)微波處理30 min之后的后續(xù)12H之內(nèi)，有將近55％的藥物被釋放，而未經(jīng)微波處理組，12H之內(nèi)只有15％的藥物被釋放。A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥膠束相對(duì)于聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥膠束有一個(gè)更好的BEL-7402腫瘤細(xì)胞攝取作用，攝取量在12H內(nèi)提高了幾近一倍，在輔以微波熱療后，抗腫瘤療效得到大幅度提高(IC50:0.7 vs1.4μg/mL)，而A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）-聚乙

9、二醇載藥磁性膠束輔以微波熱療的抗腫瘤療效在A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥膠柬輔以微波熱療的抗腫瘤療效基礎(chǔ)上，進(jìn)一步得到了提高。另外，該A54-聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥磁性膠束在尾靜脈給藥24 H后，可以有效聚集到腫瘤部位，幾近聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）磁性膠束的2倍，輔以微波熱療之后，腫瘤部位的溫度在15 min之內(nèi)提高了10℃，體內(nèi)抗腫瘤療效相比于聚乙二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥膠束組和A54-聚乙

10、二醇-聚（丙烯酰胺-丙烯腈）載藥膠束組，都得到了顯著提高(p＜0.05)。
　　⑷提供了一種可控的并且具有可調(diào)節(jié)的上臨界溶解溫度和自聚集行為的兩親性聚合物合成方法;利用上臨界溶解溫度在43℃的聚合物構(gòu)建了上臨界溶解溫度型聚合物納米給藥系統(tǒng)用于抗腫瘤研究，該聚合物納米該藥系統(tǒng)在完成將抗腫瘤藥物特異性遞送到腫瘤部位的任務(wù)后，能對(duì)腫瘤部位溫度的升高（微波熱療）作出響應(yīng)，完成藥物的快速釋放，使抗腫瘤的化療療效得到提高;進(jìn)而，構(gòu)建了一種肝癌