抗癌藥靶向（葉酸介導(dǎo)）納米給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、目的：合成葉酸偶聯(lián)牛血清白蛋白(F—BSA)；制備載藥葉酸偶聯(lián)牛血清白蛋白納米粒(F—BSANP)，并對其包封率及其靶向性進(jìn)行評價(jià)。 方法：1、葉酸在縮合劑的作用下與牛血清白蛋白偶聯(lián)。以葉酸與白蛋白的偶聯(lián)率為評價(jià)指標(biāo)，運(yùn)用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化葉酸偶聯(lián)牛血清白蛋白的合成條件。 2、用去溶劑法制備納米粒。同樣也采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)納米粒的制備實(shí)驗(yàn)，以包封率為評價(jià)指標(biāo)篩選最佳的制備工藝。 3、選擇A549肺癌細(xì)胞作為靶

2、細(xì)胞，而人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)作為正常的對照細(xì)胞。整個(gè)實(shí)驗(yàn)分為五組：生理鹽水組、砒霜組、載藥F—BSANP三個(gè)劑量組、葉酸阻斷組、載藥白蛋白納米粒(BSANP)組。采用MTT法進(jìn)行細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)。 4、采用直接注射法建立小鼠肝癌模型。而后取肝癌小鼠分為三組：游離鈣黃綠素組、包裹鈣黃綠素的BSANP組和包裹鈣黃綠素的F—BSANP組，進(jìn)行體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)。 5、取肝癌小鼠隨機(jī)分成四組：生理鹽水組、包裹砒霜的BSANP組、包

3、裹砒霜的F—BSANP組、羥基脲組。尾靜脈給藥，進(jìn)行藥效實(shí)驗(yàn)。以生存時(shí)間為評價(jià)指標(biāo)。 結(jié)果：1、運(yùn)用最優(yōu)合成條件合成了偶聯(lián)率為30.31μg/mg的葉酸偶聯(lián)牛血清白蛋白；而在最佳條件下制備的納米粒包封率為10.3％。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)顯示：當(dāng)砒霜濃度為1μg/ml時(shí)，F(xiàn)—BSANP對靶細(xì)胞的抑制率為72％，而對正常細(xì)胞僅為13％；BSANP對靶細(xì)胞的抑制率為14％，對正常細(xì)胞為10％。 2、不同載體包裹的藥物在體內(nèi)的蓄積不同。

4、F—BSANP組肝濃度峰值明顯高于BSANP組，二者峰值也明顯高于游離鈣黃綠素組。動物模型藥效實(shí)驗(yàn)顯示生理鹽水組小鼠生存期為5.10±2.08，而BSANP組為7.50±3.84；F—BSANP組為12.30±5.17；羥基脲組為8.90±3.38。 結(jié)論：采用溫和條件下合成的F—BSA制成的載藥納米粒，對靶細(xì)胞具有特異性殺傷作用：另外，載藥F—BSANP能顯著延長腫瘤小鼠的生存期。葉酸偶聯(lián)白蛋白納米粒具有主動靶向性并且該主動靶