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文檔簡(jiǎn)介
1、肥胖與高血脂、糖尿病等代謝綜合征密切相關(guān),已經(jīng)成為全球公共健康問(wèn)題。肥胖的發(fā)生與很多因素相關(guān),其中長(zhǎng)期的高脂膳食是引起肥胖的一個(gè)重要因素。由于藥物及手術(shù)等控制體重會(huì)引起一些副作用,因此,在食品科學(xué)領(lǐng)域,尋求治療高脂膳食引起的肥胖受到廣泛關(guān)注。益生菌作為一種對(duì)人體健康有益的活的微生物,現(xiàn)如今被用于治療肥胖的一種手段。然而益生菌治療肥胖的機(jī)制尚不明確,需要進(jìn)一步研究。
本課題擬從三株乳酸菌中篩選出對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)Balb/c小鼠肥胖
2、有明顯抑制作用的益生菌株,研究其對(duì)肥胖小鼠肝臟的影響;探究肥胖小鼠腸道菌群變化及脂肪因子的改變,進(jìn)而推斷乳桿菌抑制小鼠肥胖形成的機(jī)制。開(kāi)發(fā)出具有減少機(jī)體脂肪沉積的專用益生菌產(chǎn)品,為肥胖的預(yù)防和控制提供新的思路。
給高脂膳食Balb/c小鼠以108及109CFU/mL劑量灌胃由本實(shí)驗(yàn)室分離鑒定得到的Lactobacillus paracaseisubsp.ParacaseiM5(M5),Lactobacillus paracas
3、ei subsp.ParacaseIX12(X12),Lactobacillus coryniformissubsp.torquensT3(T3)三株乳桿菌,6周末,M5及T3顯著降低小鼠體重,體脂率及Lee’s指數(shù)(P<0.05),并且呈現(xiàn)出劑量依賴性。通過(guò)測(cè)定小鼠血清甘油三酯(TG),總膽固醇(TC),高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白含量(LDL),結(jié)果顯示,M5及T3高劑量組顯著降低血清TG、TC、LDL含量,顯著升高HDL含
4、量(P<0.05)。同時(shí)三株乳桿菌以相同劑量灌胃對(duì)照膳食組小鼠,并未對(duì)小鼠產(chǎn)生不良影響。綜上結(jié)果提示,M5及T3菌株能抑制高脂膳食引起的小鼠肥胖及血脂升高。
三株乳桿菌通過(guò)抑制肝臟脂質(zhì)累積及氧化應(yīng)激,從而抑制了非酒精性脂肪肝的發(fā)生:通過(guò)肝臟HE染色切片可見(jiàn),乳桿菌灌胃高脂膳食小鼠后,T3及M5兩株菌明顯改善小鼠肝臟脂肪病變;通過(guò)對(duì)肝臟甘油三脂含量的測(cè)定可知,乳桿菌的灌胃降低了高脂膳食小鼠的肝臟TG含量,抑制了肝臟脂質(zhì)的累積,從
5、而抑制了脂肪肝的發(fā)生,其中T3及M5兩株菌效果顯著(P<0.05);長(zhǎng)期高脂膳食使小鼠肝臟受到氧化損傷,乳桿菌灌胃小鼠后,小鼠肝臟抗氧化酶SOD,GSH-Px,CAT水平顯著升高(P<0.05),且呈現(xiàn)出劑量依賴性;同時(shí)肝臟MDA水平下降,T-AOC水平升高,抗氧化能力增強(qiáng),同樣是T3及M5兩株菌效果好于X12;并且小鼠體脂率與SOD、GSH-Px、CAT及T-AOC呈負(fù)相關(guān),與MDA呈正相關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示乳桿菌T3及M5有效抑制了肝臟
6、的損傷,為預(yù)防肥胖引起的脂肪肝提供了新思路。
乳桿菌通過(guò)調(diào)節(jié)脂肪因子的表達(dá)來(lái)控制肥胖發(fā)生:采用ELISA法測(cè)定小鼠血清瘦素及脂聯(lián)素的含量,結(jié)果顯示M5及T3灌胃6周后,血清瘦素水平降低,及脂聯(lián)素水平顯著升高(P<0.05);RT-PCR法檢測(cè)小鼠脂肪組織中相關(guān)脂肪因子的表達(dá),結(jié)果顯示高脂膳食使PPAR-γ、TNF-α及FAS表達(dá)量顯著升高,經(jīng)M5及T3灌胃6周后顯著降低了其表達(dá)量;X12效果不顯著(P<0.05)。
7、通過(guò)高通量測(cè)序方法對(duì)小鼠腸道菌群多樣性進(jìn)行分析。高脂膳食誘導(dǎo)的小鼠肥胖使小鼠腸道菌群發(fā)生變化,肥胖使厚壁桿菌與擬桿菌門的比值降低,乳桿菌M5、T3灌胃6周后,小鼠腸道菌群多樣性發(fā)生變化,通過(guò)PCoA分析可知,M5、T3干預(yù)使高脂膳食小鼠腸道菌群組成趨近于普通膳食小鼠。通過(guò)對(duì)結(jié)腸組織MDA和T-AOC含量的測(cè)定,結(jié)果顯示M5及T3顯著降低MDA,提高T-AOC含量(P<0.05)。結(jié)合高通量測(cè)序結(jié)果的比較分析可知,灌胃M5、T3后有效控制
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