功能化嵌段納米膠束和雙模板印跡聚合物給藥系統(tǒng)研究.pdf

1、研究目的：在聚合物膠束納米載體中，聚乙二醇（PEG）—聚多肽雙親性嵌段聚合物膠束在應(yīng)用于藥物以及基因傳遞系統(tǒng)方面得到了關(guān)注。經(jīng)過PEG修飾的聚合物，即PEG-PLL(聚乙二醇-聚賴氨酸)聚離子復(fù)合物(PIC)已經(jīng)取得了一定的基因轉(zhuǎn)染效率，但在體內(nèi)基因傳遞時(shí)卻很難到達(dá)靶細(xì)胞。為了提高對特殊細(xì)胞的靶向傳遞效率，我們引入靶向配體到 PIC表面。
　　研究內(nèi)容與方法：論文第一部分首次對配體進(jìn)行修飾，通過不同的化學(xué)合成方法分別合成了膽固醇-

2、聚乙二醇-葉酸或者膽固醇-聚乙二醇-半乳糖配體，葉酸可以靶向性的識(shí)別特殊細(xì)胞尤其是癌細(xì)胞表面過度表達(dá)的葉酸受體，半乳糖可以識(shí)別腫瘤細(xì)胞特別是肝癌細(xì)胞表面過度表達(dá)的脫唾液酸糖蛋白。配體共聚物可以直接通過物理混合方法被引入到 PIC中。
　　結(jié)果和結(jié)論：MALDI-TOF分析成功的合成了膽固醇-聚乙二醇-葉酸或者膽固醇-聚乙二醇-半乳糖共聚物；在粒徑分析方面，靶向配體的引入并沒有明顯的改變PIC的粒徑（粒徑增加少于10 nm）；通過細(xì)

3、胞攝取以及基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)得出，當(dāng)引入5％質(zhì)量比的葉酸共聚物以及20%的半乳糖共聚物時(shí)可以明顯的增加細(xì)胞攝取率以及基因轉(zhuǎn)染率；共聚焦熒光顯微鏡觀察出5%的葉酸或者10%的半乳糖配體的引入明顯的增加了綠色熒光蛋白表達(dá)；細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明一定量配體的引入沒有引起明顯的細(xì)胞毒性。因此，可以通過靈活多變的方式引入不同的靶向配體共聚物到 PIC中，實(shí)現(xiàn)不同位點(diǎn)的靶向遞送。聚乙二醇—聚多肽雙親性嵌段聚合物膠束除了可以用作基因傳遞的載體，還可以作為藥物緩控

4、釋的載體。我們知道，藥物緩控釋過程中，藥物與載體的相互作用對于藥物的有效釋放起關(guān)鍵性的作用。研究內(nèi)容與方法：論文第二部分通過開環(huán)聚合的方法制備了聚乙二醇-聚谷氨酸（PEG-PLG），聚乙二醇-聚谷氨酸卞酯（PEG-PBLG）聚多肽膠束聚合物，考察對通過不同的作用結(jié)合抗癌藥物阿霉素(DOX)的兩種膠束的藥物釋放行為進(jìn)行研究。結(jié)果和結(jié)論：通過動(dòng)態(tài)光散射表征兩種膠束的粒徑，PEG-PLG/DOX粒徑要大于 PEG-PBLG/DOX，原因是前者

5、可通過靜電以及疏水雙重作用結(jié)合更多的藥物，從而使得膠束核要大于后者；通過載藥量比較，相較于PEG-PBLG（DLE最大值為53.5%），PEG-PLG（DLE最大值為61.3%）具有更大的載藥量；體外釋放實(shí)驗(yàn)得出，在不同 pH條件下， PEG-PLG/DOX膠束具有一定的pH響應(yīng)性，越低的pH越有利于阿霉素的釋放，在pH4.0條件下，最大釋藥量超過60%，而PEG-PBLG/DOX僅為40%；細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表征，單純的聚合物幾乎沒有細(xì)胞毒

6、性，當(dāng)與阿霉素形成膠束后，其細(xì)胞活性是以一種劑量-依賴性的方式逐漸降低的，且PEG-PLG/DOX膠束的細(xì)胞活性要弱于PEG-PBLG/DOX膠束。通過一系列表征，可以得出通過靜電以及疏水作用結(jié)合藥物的PEG-PLG/DOX膠束，是具有更大載藥量且在一定的pH條件下具有更佳藥物釋放性能的膠束。在分子印跡系統(tǒng)中使用多個(gè)模板是分子印跡技術(shù)新的發(fā)展方向，而大分子擁擠是一種有效地促進(jìn)分子印跡效果的方法。研究內(nèi)容與方法：本文的第三部分以甲基丙烯酸

7、為功能單體，二甲基丙烯酸乙二醇酯為交聯(lián)劑，加入分子擁擠試劑聚苯乙烯的四氫呋喃為致孔劑，制備雙模板分子印跡聚合物，用作藥物的控緩釋材料。結(jié)果和結(jié)論：固定一模板為S-OFX（左旋氧氟沙星），考察其它不同種類，包括：三嗪類、非甾體類、沙星類以及地平類對S-OFX印跡因子的影響。發(fā)現(xiàn)當(dāng)使用非甾體類S-NAP(左旋萘普生)系列時(shí)，雙模板均可取得較高的印跡因子，IFS-OFX=20.1，IFS-NAP=10.9,而各自的單模板印跡整體柱的印跡因子分

8、別為：IFS-OFX=22.4，IFS-NAP=11.9，說明分子擁擠效應(yīng)的存在下，雙模板間對功能單體的競爭并沒有明顯的影響到各自的印跡效果。通過平衡吸附試驗(yàn)，對比研究了根據(jù)不同S-OFX/S-NAP比例制備的整體柱的吸附性能，表明 S-OFX/S-NAP=1/1時(shí)具有最大的吸附量，S-OFX的Qmax達(dá)到了37.33 mmol/g，S-NAP的也達(dá)到了18.70 mmol/g，表明擁擠效應(yīng)下印跡聚合物具有較強(qiáng)的吸附性能，有望應(yīng)用于制備