GSH響應(yīng)的聚合物前藥納米給藥系統(tǒng)的制備及研究.pdf

1、6-巰基嘌呤（6-MP）是一種應(yīng)用于兒童急性淋巴細(xì)胞白血病維持治療的主要藥物，然而，由于它存在水溶性差（約180μg/mL），血漿半衰期短（0.5-1.5h），生物利用度差異大（約16％），伴隨有嚴(yán)重的骨髓抑制及肝臟毒性等缺點(diǎn)，正是這些缺點(diǎn)極大地限制了它在臨床中的應(yīng)用。為了改善6-MP的這些缺陷，本文中，我們首先制備了一種6-MP兩親性聚合物前藥PTA-mPEG，然后利用該聚合物前藥的兩親性特征制備谷胱甘肽(GSH)刺激響應(yīng)的聚合物前藥

2、膠束。不同于常見(jiàn)的基于谷胱甘肽敏感的二硫鍵設(shè)計(jì)，該聚合物前藥膠束的谷胱甘肽敏感策略是基于一個(gè)Michael加成-消除反應(yīng)，具體來(lái)說(shuō)，含有α,β-不飽和羰基的兩親性聚合物前藥(PTA-mPEG)作為Michael受體能夠接受親核試劑-GSH的進(jìn)攻，然后經(jīng)歷Michael消除反應(yīng)釋放出原藥6-MP。此外，聚合物前藥膠束的聚乙二醇外殼有助于膠束粒子在機(jī)體中獲得隱形特性。
　　主要的工作和結(jié)論總結(jié)如下：
　　一、兩親性6-MP聚合物

3、前藥的制備及表征：
　　首先，以6-MP與丙炔酸為原料制備6-MP的小分子前藥PTA；然后通過(guò)PTA上的羧基與mPEG的末端羥基反應(yīng)制得兩親性聚合物前藥PTA-mPEG；最后，采用紅外、核磁表征確證了PTA及PTA-mPEG的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
　　二、以PTA-mPEG為原料制備聚合物前藥膠束，并研究聚合物前藥膠束的大小形態(tài)、臨界膠束濃度(CMC)、貯存穩(wěn)定性及谷胱甘肽敏感特性。
　　透射電鏡圖表明聚合物前藥膠束外形近似球形

4、，具有明顯的核殼結(jié)構(gòu)，粒子大小統(tǒng)一，分布均勻。臨界膠束濃度(CMC)實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果表明，該聚合物前藥膠束CMC較低(PM-1的CMC值為4.50×10-3mg/mL；PM-2為2.72×10-2mg/mL)有利于粒子在體循環(huán)中承受大量的體液稀釋而維持膠束形態(tài)不被破壞，即擁有較好的稀釋穩(wěn)定性。利用納米粒度和Zeta電位儀測(cè)定聚合物前藥膠束溶液在靜置貯存15天前后膠束粒子的平均粒徑(MD)及多分散系數(shù)(PDI)，通過(guò)比較貯存前后測(cè)得的數(shù)據(jù)可知

5、，兩者差別不大，表明該聚合物前藥膠束具有良好的貯存穩(wěn)定性。谷胱甘肽(GSH)敏感實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于微摩爾濃度的GSH，聚合物前藥膠束在毫摩爾濃度的GSH下更為敏感。
　　三、GSH響應(yīng)的聚合物前藥膠束釋藥研究：
　　考察不同GSH濃度下聚合物前藥膠束的6-MP釋放情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， 6-MP的釋放呈GSH濃度依賴型。與微摩爾濃度的GSH刺激相比，毫摩爾濃度GSH刺激下的聚合物前藥膠束釋藥率更高。
　　四、

6、聚合物前藥膠束的長(zhǎng)循環(huán)實(shí)驗(yàn)：
　　利用HL-60為白血病癌細(xì)胞模型測(cè)定聚合物前藥膠束對(duì)白血病細(xì)胞的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，細(xì)胞抑制率與6-MP的劑量相關(guān)，劑量越高，細(xì)胞抑制率越強(qiáng)。HL-60細(xì)胞對(duì)聚合物前藥膠束攝取實(shí)驗(yàn)表明，聚合物前藥膠束能夠進(jìn)入細(xì)胞并釋放6-MP原藥。利用小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1模擬機(jī)體的免疫清除系統(tǒng)測(cè)定聚合物前藥膠束的體外長(zhǎng)循環(huán)特性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于我們課題組先前研究的6-MP-CMCS（6-巰基嘌呤