版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、S-腺苷蛋氨酸(SAM)是一種廣泛存在于各種組織和細(xì)胞中的生物小分子,具有轉(zhuǎn)甲基、轉(zhuǎn)硫和轉(zhuǎn)氨丙基等重要生理作用,已成為治療肝損傷、膽汁郁積和抑郁癥等疾病的重要藥物。 提取酵母染色體DNA并以其為模板,通過(guò)PCR的方法獲得目的基因sam2;PCR產(chǎn)物經(jīng)純化后與T載體相連,構(gòu)建克隆載體pT-sam2;pT-sam2經(jīng)EcoRI酶切、NcoI部分酶切后插入pET20b(+)載體信號(hào)肽pelB的下游,構(gòu)建了胞外表達(dá)重組質(zhì)粒,命名為pET
2、O-sam2;再以構(gòu)建成功的pETO-sam2為模板,設(shè)計(jì)一對(duì)尾-尾相對(duì)且5'端帶有相同酶切位點(diǎn)的引物,應(yīng)用全質(zhì)粒PCR的方法將pETO-sam2中的pelB信號(hào)肽序列去除,全質(zhì)粒PCR產(chǎn)物經(jīng)NdeI單酶切、T4連接酶連接,構(gòu)建胞內(nèi)表達(dá)重組質(zhì)粒,命名為pETI-sam2。 結(jié)果表明胞外表達(dá)對(duì)宿主菌E.cole BL21(DE3)呈致死現(xiàn)象;胞內(nèi)表達(dá)獲得成功,重組菌經(jīng)1mM IPTG誘導(dǎo)6h并在其培養(yǎng)基中添加L-蛋氨酸至終濃度為0
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 釀酒酵母S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及表達(dá)研究.pdf
- 28736.蛋氨酸裂解酶的基因克隆及表達(dá)
- 油茶中茶氨酸的檢測(cè)和茶氨酸合成酶基因的克隆與表達(dá).pdf
- 生物合成法生產(chǎn)腺苷蛋氨酸研究及γ-聚谷氨酸腺苷蛋氨酸鹽制備.pdf
- 銀杏查爾酮合成酶基因和苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及表達(dá).pdf
- 波蘭小麥蔗糖合成酶基因的克隆及表達(dá)分析.pdf
- 酵母菌中海藻糖合成酶基因的克隆及高效表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf
- 生物合成法生產(chǎn)腺苷蛋氨酸.pdf
- 西瓜ACC合成酶基因的表達(dá)分析與克隆.pdf
- 1788.釀酒酵母代謝工程菌利用dl蛋氨酸合成s腺苷蛋氨酸的研究
- 家蠶表皮型幾丁質(zhì)合成酶基因的克隆及表達(dá)分析.pdf
- 蠟梅半胱氨酸合成酶基因CPCysA的克隆分析與表達(dá)載體構(gòu)建.pdf
- 小麥抗旱指標(biāo)篩選與S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆和功能分析.pdf
- 釀酒酵母全細(xì)胞催化合成S-腺苷蛋氨酸的研究.pdf
- 酶法生產(chǎn)s-腺苷蛋氨酸.pdf
- 菊芋果聚糖合成酶基因克隆與表達(dá)分析.pdf
- 棉花杜松烯合成酶基因的克隆及其表達(dá)分析.pdf
- 葡萄白藜蘆醇合成酶基因的克隆及其在畢赤酵母中的表達(dá).pdf
- 蘋果酸合成酶Glcb基因克隆及表達(dá)特性研究.pdf
- 甜菜夜蛾幾丁質(zhì)合成酶基因的克隆和表達(dá)研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論