Wnt信號(hào)通路在LPS所致的ARDS早期肺纖維化中作用.pdf

1、目的：
　　本實(shí)驗(yàn)以脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)誘發(fā)小鼠急性肺損傷，通過相關(guān)方法證明在ARDS早期已發(fā)生纖維化，通過觀察肺組織wnt信號(hào)通路核心元件beta-catenin的mRNA表達(dá)的變化，探討wnt信號(hào)通路在ARDS早期所致的肺纖維化中可能發(fā)揮的作用及其相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　方法：
　　建立ARDS模型:主要根據(jù)二次打擊學(xué)說建立ARDS動(dòng)物模型[1]。
　　32只雄性SD大鼠隨機(jī)分為

2、4組:對(duì)照組（8只）:第一天腹腔內(nèi)注射生理鹽水(10ml/day)觀察24小時(shí)。實(shí)驗(yàn)組（24只）分成3組:實(shí)驗(yàn)組1:第一天腹腔注射LPS(8 mg/kg)[2];觀察24小時(shí);實(shí)驗(yàn)組2:第一天和24h后腹腔注射LPS（8 mg/kg）觀察48小時(shí);實(shí)驗(yàn)組3:第一天和24h后腹腔注射LPS(8 mg/kg)觀察7天;后予水合氯醛麻醉后，固定于操作臺(tái)上，并于無菌環(huán)境下取出肺組織。
　　通過觀察一般情況，肺組織濕干重，血?dú)夥治?，HE染色

3、觀察肺組織炎癥損傷的程度;
　　通過Masson染色觀察膠原纖維;
　　通過Real Time PCR技術(shù)檢測(cè)肺組織中wnt信號(hào)通路核心分子:beta-catenin的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1、正常組大鼠未見明顯異常表現(xiàn);實(shí)驗(yàn)組大鼠觀察可觀察到在內(nèi)毒素腹腔注射后大鼠出現(xiàn)蜷縮少動(dòng)、發(fā)抖、呼吸急促，不思飲食等表現(xiàn)。
　　2、濕干重比值結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較肺濕干重比值明顯不同，實(shí)驗(yàn)組干濕重比明顯

4、大于對(duì)照組(p＜0.05)，并且在48小時(shí)肺水腫最嚴(yán)重。
　　3、動(dòng)脈血?dú)夥治鼋Y(jié)果:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較氧合指數(shù)明顯不同，實(shí)驗(yàn)組氧合指數(shù)明顯低于對(duì)照組(p＜0.05)，并且在48小時(shí)氧合指數(shù)最低。
　　4、肺組織HE染色:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較HE染色結(jié)果不同，對(duì)照組肺組織結(jié)構(gòu)清晰完整，無充血滲出，炎細(xì)胞侵潤(rùn)。實(shí)驗(yàn)組肺組織結(jié)構(gòu)不完整，有充血，滲出，炎細(xì)胞侵潤(rùn)。
　　5、肺組織Masson染色:對(duì)照組僅在血管及支氣管周圍見到少