DNA錯(cuò)配修復(fù)基因多態(tài)性與原發(fā)性肝癌的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、本研究將探討MMR基因中與腫瘤相關(guān)的15個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，在中國(guó)北方漢族人群中肝癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)及預(yù)后的關(guān)聯(lián)性;不同因素對(duì)肝癌患者生活質(zhì)量的影響及EORTC QLQ-C30量表的應(yīng)用。以期闡明MMR基因多態(tài)性在肝癌發(fā)生和疾病進(jìn)展中的作用，對(duì)肝癌易感人群進(jìn)行有針對(duì)性的預(yù)防措施，降低肝癌的發(fā)病率，提高患者的生活質(zhì)量。本文主要從以下幾部分展開(kāi)論述:
　　第一部分 DNA錯(cuò)配修復(fù)基因多態(tài)性與原發(fā)性肝癌的易感因素研究
　　目的:本研究擬探討M

2、SH5(rs1150793，rs2075789，rs3117582和rs3131379); MSH3(rs26279和rs184967);MSH4(rs5745549和rs5745325);MSH2(rs1800152和rs1802577);MLH1rs1799977; MLH3rs175080;MSH6rs1042821;PMS1rs5742933及PMS2rs1059060這9個(gè)基因的15個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與原發(fā)性肝癌(PHC)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的

3、關(guān)系。
　　方法:選擇符合條件的研究對(duì)象508例，分成病例組和對(duì)照組。抽提組織DNA，應(yīng)用SnaPshot實(shí)驗(yàn)平臺(tái)對(duì)已提取的DNA進(jìn)行SNP分型。
　　先進(jìn)行單因素分析，再用非條件Logistic回歸分析校正混雜因素，分析SNP位點(diǎn)與PHC易感性關(guān)聯(lián)，最后由SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。
　　結(jié)果:
　　1.rs175080A為肝癌易感性的危險(xiǎn)因素。
　　2.MSH3多態(tài)性位點(diǎn)rs26279與

4、肝癌易感性的關(guān)系。
　　3.MSH5多態(tài)性位點(diǎn)rs2075789與肝癌易感性的關(guān)系。
　　4.MSH6多態(tài)性位點(diǎn)rs1042821與肝癌易感性的關(guān)系。
　　5.尚未發(fā)現(xiàn)MSH5基因的rs1150793位點(diǎn)，PMS1基因的rs5742933位點(diǎn)和PMS2基因的rs1059060位點(diǎn)與PHC的發(fā)生相關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)論:
　　1.在中國(guó)北方漢族人群中，MLH3基因的rs175080位點(diǎn)、MSH3基因的rs26279

5、位點(diǎn)、MSH5基因的rs2075789和MSH6基因的rs1042821位點(diǎn)與肝癌易感性的發(fā)生有關(guān)系。
　　2.MLH3基因的rs175080位點(diǎn)、MSH3基因的rs26279位點(diǎn)、MSH5基因的rs2075789是肝癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素，攜帶rs175080A、rs26279G和rs2075789A等位基因的個(gè)體為肝癌發(fā)病高風(fēng)險(xiǎn)人群。
　　3.MSH6基因的rs1042821位點(diǎn)是肝癌發(fā)生的保護(hù)因素，攜帶rs1042821T等

6、位基因的個(gè)體不容易發(fā)生肝癌。
　　4.本研究未發(fā)現(xiàn)MSH5基因的rs1150793位點(diǎn)，PMS1基因的rs5742933位點(diǎn)和PMS2基因的rs1059060位點(diǎn)與肝癌的發(fā)生相關(guān)聯(lián)。
　　第二部分 DNA錯(cuò)配修復(fù)基因多態(tài)性與原發(fā)性肝癌的預(yù)后關(guān)系研究
　　目的:本研究擬探討MSH5(rs1150793，rs2075789，rs3117582和rs3131379);MSH3(rs26279和rs184967);MSH4(r

7、s5745549和rs5745325);MSH2(rs1800152和rs1802577);MLH1rs1799977;MLH3rs175080;MSH6rs1042821;PMS1rs5742933及PMS2rs1059060這9個(gè)基因的15個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與原發(fā)性肝癌(PHC)根治術(shù)后患者的預(yù)后生存關(guān)系。
　　方法:選擇符合條件的研究對(duì)象250例，以問(wèn)卷形式收集研究對(duì)象的一般情況、詳細(xì)的臨床及預(yù)后生存資料，并收集肝組織，于-80℃

8、低溫冰箱中保存。使用Qiagen基因組DNA提取試劑盒（德國(guó)Hilden，Qiagen公司）抽提組織DNA，應(yīng)用SnaPshot實(shí)驗(yàn)平臺(tái)對(duì)已提取的DNA進(jìn)行SNP分型。統(tǒng)計(jì)方法采用單因素和多因素Cox回歸模型分析多態(tài)性位點(diǎn)與PHC患者生存期的關(guān)系，并計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)比(Hazard ritiao，HR)和95％置信區(qū)間（95％confidence intervals，95％CI），以P＜0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，檢驗(yàn)水準(zhǔn)均為雙側(cè)，采用SPSS

9、16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。
　　結(jié)果:
　　1.MSH3基因多態(tài)性位點(diǎn)rs26279與PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期的關(guān)系。
　　2.MSH6基因多態(tài)性位點(diǎn)rs1042821與PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期關(guān)系。
　　3.PMS1基因多態(tài)性位點(diǎn)rs5742933與PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期關(guān)系。
　　4.PMS2基因多態(tài)性位點(diǎn)rs1059060與PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期關(guān)系。
　　5.ML

10、H3基因的多態(tài)性位點(diǎn)rs175080與MSH5基因的多態(tài)性位點(diǎn)rs1150793、rs2075789與PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期的相關(guān)性。
　　單因素分析與多因素分析均未發(fā)現(xiàn)rs175080、rs1150793、rs2075789與PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期的關(guān)聯(lián)。
　　6.各位點(diǎn)對(duì)PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期的聯(lián)合作用
　　將與PHC根治術(shù)后患者生存期有關(guān)的位點(diǎn)聯(lián)合分析，以性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤類型、Chil

11、d-Pugh分級(jí)、門脈瘤栓、TNM及基因分型為自變量，以生存時(shí)間為因變量做多因COX回歸分析，結(jié)果顯示，具有三個(gè)危險(xiǎn)基因型的個(gè)體死亡的風(fēng)險(xiǎn)為無(wú)危險(xiǎn)基因型個(gè)體的4.114(2.210，7.659)倍(P＜0.001)，具有四個(gè)危險(xiǎn)基因型的個(gè)體死亡的風(fēng)險(xiǎn)為無(wú)危險(xiǎn)基因型個(gè)體的10.066(2.927，34.618)倍(P＜0.001)，尚未發(fā)現(xiàn)具有一個(gè)和兩個(gè)危險(xiǎn)基因型個(gè)體與PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期的關(guān)聯(lián)。
　　7.根據(jù)各位點(diǎn)聯(lián)合作用

12、的分析結(jié)果，將具有兩個(gè)及以下危險(xiǎn)基因型的個(gè)體分為一組，將具有三個(gè)和四個(gè)基因型的個(gè)體分為一組，以性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤類型、Child-Pugh分級(jí)、門脈瘤栓、TNM及基因分型為自變量，以生存時(shí)間為因變量做多因COX回歸分析，結(jié)果顯示，具有三個(gè)以上危險(xiǎn)基因型的個(gè)體死亡的風(fēng)險(xiǎn)為具有兩個(gè)及以下危險(xiǎn)基因型個(gè)體的2.010(1.471,2.747)倍(P＜0.001)。
　　結(jié)論:
　　1.MSH3基因多態(tài)性位點(diǎn)rs26279與P

13、HC根治術(shù)后患者預(yù)后患者生存期有關(guān)。
　　2.MSH6基因多態(tài)性位點(diǎn)rs1042821與PHC患者生存期有關(guān)，rs1042821T為影響生存期的危險(xiǎn)等位基因。
　　3.PMS1基因多態(tài)性位點(diǎn)rs5742933與PHC患者生存期有關(guān)，rs5742933C為影響生存期的危險(xiǎn)等位基因。
　　4.MSH3基因多態(tài)性位點(diǎn)rs1059060與PHC根治術(shù)后患者預(yù)后生存期有關(guān)，rs1059060T為影響生存期的危險(xiǎn)等位基因。

14、　　5.尚未發(fā)現(xiàn)rs175080、rs1150793和rs2075789與PHC患者生存期的相關(guān)性。
　　6.腫瘤大小、門脈瘤栓、TNM為影響生存期的獨(dú)立影響因素，腫瘤越大、有門脈血栓、TNM分級(jí)越高，患者死亡風(fēng)險(xiǎn)越高。
　　第三部分 中國(guó)北方漢族人群原發(fā)性肝癌的影響因素研究
　　目地:用流行病學(xué)的方法，研究影響中國(guó)北方漢族人群肝癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素、不同因素對(duì)肝癌患者生活質(zhì)量的影響及EORTC QLQ-C30量表的應(yīng)用。

15、對(duì)肝癌易感人群進(jìn)行有針對(duì)性的預(yù)防措施，降低肝癌的發(fā)病率，提高患者的生活質(zhì)量。
　　方法:以問(wèn)卷調(diào)查和量表的形式收集符合條件的研究對(duì)象資料。采用病例對(duì)照研究，通過(guò)非條件logistic回歸分析，對(duì)中國(guó)北方漢族人群PHC的易感因素進(jìn)行分析;用多元線性回歸分析，研究不同因素對(duì)肝癌患者生活質(zhì)量的影響;用t檢驗(yàn)、方差分析比較不同患者的生活質(zhì)量得分。
　　結(jié)果:
　　1.BMI增高，男性，吸煙、飲酒，常食用霉變食品、剩飯菜、腌制食

16、品，乙肝家族史，肝癌家族史，糖尿病患病史，HBV感染及HCV感染為原發(fā)性肝癌的危險(xiǎn)因素(P＜0.05)，多吃蔬菜和水果為原發(fā)性肝癌的保護(hù)性因素(P＜0.05)。
　　2.肝癌患者的年齡、家庭月收入、婚姻狀況、肝炎病程、營(yíng)養(yǎng)狀況與生活質(zhì)量關(guān)系密切（P＜0.05），肝癌患者的性別、文化程度、付費(fèi)方式、居住地對(duì)生活質(zhì)量的影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.EORTC QLQ-C30量表各項(xiàng)目的克朗巴赫系數(shù)值均在0.710以上，兩次測(cè)量的相

17、關(guān)系數(shù)均在0.690以上，提取的公因子及各條目在公因子上的最大載荷值分布與問(wèn)卷結(jié)構(gòu)相一致;性別、年齡、婚姻狀況對(duì)肝癌患者生活質(zhì)量得分的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.改變吸煙、飲酒等不良生活方式，改善飲食習(xí)慣，積極治療糖尿病、HBV感染及HCV等基礎(chǔ)疾病是預(yù)防中國(guó)北方漢族人群PHC的關(guān)鍵。
　　2.在對(duì)肝癌進(jìn)行治療時(shí)，應(yīng)關(guān)注影響患者生活質(zhì)量的不同因素，有針對(duì)性地采取防治措施。
　　3.應(yīng)用