蓮心堿抑制膀胱癌細(xì)胞5637增殖并下調(diào)CDK-2的表達(dá).pdf

1、目的：通過蓮心堿（Liensinine）對(duì)膀胱癌5637細(xì)胞的作用，研究蓮心堿對(duì)膀胱癌細(xì)胞5637增殖及細(xì)胞周期的影響，初步探討蓮心堿對(duì)膀胱癌5637細(xì)胞周期影響的作用機(jī)制。
　　方法：用濃度分別為（1.562、3.125、6.250、12.500、25.000μg/mL）的蓮心堿溶液，處理膀胱癌5637細(xì)胞，使用CCK-8法及克隆形成實(shí)驗(yàn)，測(cè)定蓮心堿對(duì)5637細(xì)胞增殖的影響；通過流式細(xì)胞術(shù)PI染色法，檢測(cè)蓮心堿對(duì)膀胱癌5637細(xì)

2、胞周期的影響；采用Western blot技術(shù)分析蓮心堿對(duì)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶CDK2表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：⑴CCK-8法檢測(cè)結(jié)果表明：隨藥物濃度的增加及孵育時(shí)間的延長(zhǎng)，蓮心堿各加藥組相對(duì)于對(duì)照組表現(xiàn)出明顯的增殖抑制作用。蓮心堿作用48 h后，5637細(xì)胞增殖抑制率分別為(7.18±0.05)％、(12.15±0.04)%、(19.21±0.01)%、(23.96±0.05)%、(30.45±0.03)%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p

3、<0.05）。⑵克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：蓮心堿對(duì)膀胱癌細(xì)胞5637的增殖有明顯的抑制作用，蓮心堿作用于膀胱癌5637細(xì)胞7 d后，克隆抑制率分別為（40.07±0.02）%、（55.66±0.05）%、（72.00±0.01）%、（85.59±0.01）%、（93.1±0.01）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=184.1，P<0.01）。⑶流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期的結(jié)果提示：5637細(xì)胞在1.5625、3.125、6.25、12.5μg/mL的蓮

4、心堿干預(yù)后，其 G1期細(xì)胞群明顯增加，占有比例為（55.03±0.81）%、（56.97±0.69）%、（57.87±0.27）%、（58±0.78）%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值：79.98，p<0.0001）。同時(shí)，我們還發(fā)現(xiàn)在25μg/mL的蓮心堿干預(yù)后，其 S期細(xì)胞群也顯著增加，占有比例為（41.51±0.62）%，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F值：143.1，p<0.0001）。⑷Western blot相關(guān)檢測(cè)結(jié)果顯示：蓮心堿組與