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文檔簡介
1、目的:研究干擾RNA(RNAi)對5637細胞survivin基因表達的干擾效應。 方法:化學合成survivin序列特異性雙鏈RNA(dsRNA),用Lipofectamrne2000轉染5637細胞,采用定量PCR檢測survivin基因的表達,用流式細胞儀檢測Annexinv標記的凋亡細胞。 結果:序列特異性dsRNA-survivin可顯著抑制suvivin基因在轉錄水平上的表達,與陰性對照組相比,在濃度為40n
2、mol/L的dsRNA-survivin轉染5637細胞24,48小時后survivinmRNA表達的抑制率分別為29%和53%,在濃度為100nmol/L的dsRNA-survivin轉染5637細胞24,48小時后survivinmRNA表達的抑制率分別為46%和86%,suvivin基因表達的抑制與5637細胞的凋亡相關聯(lián)。 結論:SUrVivin的siRNA在膀胱癌5637細胞中有較高的轉染效率:當survivin的si
3、RNA濃度為100nmol/L,轉染48小時后,干擾效率高達86%,并且5637細胞凋亡明顯增多,survivinmRNA表達明顯下調,可望成為膀胱癌基因治療的新途徑。 雙鏈RNA(DsRNA)誘導與之同源的mRNA降解,從而導致轉錄后基因沉默(post-transcriptionalgenesilencing,PTGS)的現(xiàn)象或機制稱為RNA干擾(RNAinterference,RNAi),在過去的幾年里,這一領域的研究發(fā)生了
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